棉籽蛋白在天冬氨酸转氨酶发酵制备中的应用研究.pdfVIP

J017 棉籽蛋白在天冬氨酸转氨酶发酵制备中的应用 高振 周华 万红贵 韦萍 （南京工业大学制药与生命科学学院，南京, 210009） 摘 要 天冬氨酸转氨酶是酶法制备 L-苯丙氨酸的关键酶，本文开展 了以棉籽蛋白替代蛋白胨和玉米浆的研究，培养大肠杆菌生产该酶，并 对替代前后的酶活进行对比，确定了最佳培养基组成及发酵条件。研究 表明，棉籽蛋白 PM8 成功替代原常规复合氮源后,培养基成本降低了 40 ％左右，发酵周期缩短了 25％，而L-苯丙氨酸的得率反而提高了 5％。 关键词 棉籽蛋白；天冬氨酸转氨酶；L-苯丙氨酸 中图分类号 Application of Cottonseed Protein for Producing Aspartate Aminotransferase Gao Zhen Zhou Hua Wan Hong-gui and Wei Ping (College of Life Science and Pharmacy, Nanjing University of Technology, Nanjing 210009) ABSTRACT The aspartate aminotransferase(AspAT) is the key enzyme in the enzymatic preparation of L-phenylalanine(L-Phe), which can be obtained from Escherichia coli . Cottonseed Protein substituting for Peptone and Corn Steep Liquor as nitrogen source in producing AspAT is researched in this paper. The optimal composition of culture medium and the condition of fermentation was obtained by comparing the different activity of AspAT. The results show that the cost of culture medium was reduced 40%, the fermentation cycle was shortened 25%, and the yield of L-Phe was enhanced 5% in the alternative scheme. Keywords Cottonseed Protein, aspartate aminotransferase, L-phenylalanine 1 前言 培养基质量的优劣是影响发酵产品成本、产量及质量高低的关键因素[1～2]。长期以来，发 酵行业所用的培养基或为其它行业的副产品如玉米浆、或借用其它行业的原料如饲用豆粕和 食用油[3]，这些产品质量不稳定、成分控制落后或成本高昂，日益成为发酵行业技术发展的一 个瓶颈。新型精细有机氮源——棉籽蛋白具有质量稳定、蛋白含量高、游离棉酚含量低、微 生物利用效果好及价格低廉等优点[4]，在欧美等国的发酵行业得到广泛应用，但它在我国发酵 行业的应用才刚刚起步。它作为一种具有性价比优势的有机氮源，可替代豆粕、酵母粉、鱼 [5～6] 粉和玉米浆等多种有机氮源，可以广泛应用于发酵行业的各个领域 。 天冬氨酸转氨酶 (Aspartate Amino -transferase,AspAT)是酶法制备 L-苯丙氨酸 （ [7～8] L-phenylalanine，L-Phe）的关键酶 ，其活性、表达量及生产成本直接影响着 L-Phe 的 市场竞争力。本文进行了新型有机氮源——棉籽蛋白在大肠杆菌发酵生产 AspAT 中的应用研 究，并