杂交瘤细胞连续灌注培养的代谢流分析研究.pdfVIP

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2018-01-03 发布于广东
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杂交瘤细胞连续灌注培养的代谢流分析研究.pdf

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J043 杂交瘤细胞连续灌注培养的代谢流分析牛红星朱明龙张旭谭文松 (华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室，上海 200237) 摘要在 0.54d-1 的灌注速率下，分别采用Medium Ⅰ和Medium Ⅱ灌注培养基，细胞最终分别达到了葡萄糖和谷氨酰胺限制的培养状态。灌注培养过程中细胞发生代谢迁移，表现出不同的代谢规律。采用 Medium 9 9 Ⅰ灌注过程中，EMP 途径通量从灌注起始时的 1.08mmol C/10 cells/hr 下降到 0.19mmol C/10 cells/hr，相应的丙酮酸生成乳酸的通量从 0.95mmol C/109cells /hr 下降到零。丙酮酸脱羧进入 TCA 的通量从 0.04mmol 9 9 C/10 cells /hr 提高到 0.10mmol C/10 cells /hr，葡萄糖限制下细胞中丙酮酸脱羧酶的活力可能增加；采用 9 Medium Ⅱ灌注过程中，谷氨酰胺脱氨反应的通量从灌注起 flu 始时的 0.22mmol C/10 cells /hr 下降到 9 9 9 0.047mmol C/10 cells/hr，相应的氨的生成从 0.096mmol/10 cells/hr 下降到 0.013mmol/10 cells/hr，这和谷氨酰胺酶活力得到调控有关。无论是在葡萄糖限制还是在谷氨酰胺限制培养条件下，单抗的比生成速率并未明显降低，关键词灌注培养杂交瘤代谢流分析中图分类号文献标识码文章编号 METABOLIC FLUX ANALYSIS IN HYBRIDOMA CELLS PERFUSION CULTURE NIU Hongxing ，ZHU Minglong ，ZHANG Xu and TAN Wensong (State Key Laboratory of Bioreactor Engineering ，East China University of Science and Technology ， 200237 ， Shanghai ，China) Abstract Fluxes of central metabolism had been analyzed in HB58 hybridoma cells perfusion culture. Two physiologically different steady states, namely glucose limitation and glutamine limitation, were obtained using Medium Ⅰand Medium Ⅱ as perfusion medium, respectively. During the course of two processes, cellular metabolism all were altered with two distinct patterns.