大肠杆菌基受态细胞制备方法的优选.pdfVIP

第二届中国资源生物技术与糖工程学术研讨会论文集 2007．07．15．18威海 大肠杆菌感受态细胞制备方法的优选 温建新”，周顺2，黄保远4，董霜4，任慧英2，刘文华2，邹玲2，李迎军2，王金宝订 山东省农业科学院济南250000；4山东省巨野县畜牧局荷泽274900 摘要：以大肠杆菌DH5Q、JMl09为受体菌，质粒DNA加入感受态细胞，经短暂冰浴和热休克后， 直接涂布预热至37℃的平板或加入LB培养基，复活一定时间后涂板。研究不同型号的菌株、不同 转化溶液、感受态细胞的存放时间、转化时间及转化后的复苏时间等对质粒转化效率的影响。结果 复苏直接用无菌水进行8倍稀释，涂平板筛选转化子，可获得较好的转化效率，每微克(1a g)质粒DNA 可以得到高达105个转化菌落。转化溶液浓度和感受态细胞的存放时间对转化效率有明显的影响，而 转化时间、冰浴时间和转化后的振荡培养复苏时间对转化效率的影响不明显。 关键词：大肠杆菌感受态细胞；制备方法；优选 The ofDifferentEscherichia Cells M