左卡尼汀在肾小管上皮细胞氧化应激损伤中的保护作用研究.pdfVIP

tubular cellline induced kidney epithelialinjury by ● ● ·● ． 0XlnatlVestress 课题来源：自选课题 专 业 名 称 泌尿外科学(器官移植) 学位申请人 叶俊生 指 导 教 师 于立新教授 答辩委员会主席 陈规划教授 答辩委员会成员 苏泽轩教授 赵明教授 胡卫列教授 肖露露教授 论文评阅人 王长希教授 陈立中教授 陆敏强教授 201 0年4月20日广州 细胞氧化应激 损伤中的保护作用研究 博士研究生：叶俊生 指导教师：于立新教授 摘要 肾脏缺血再灌注损伤可发生于多种疾病情况下，如休克、外科手术、移植、 糖尿病肾病、慢性。肾小管一间质损伤等，并伴随着氧化应激的增加。氧化应激 由活性氧介导，包括自由基如超氧阴离子、羟基和非自由基如过氧化氢。活性 氧在肾组织巾的肾小球、间质肾小管、系膜细胞中产生，而组织中的抗氧化防 御系统如低分子量抗氧化剂(抗坏血酸素C、谷胱甘肽、维生素E等)、ROS反 应酶(超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶)以及氧化还原调节酶等会 同时被激活，抑制活性氧生成并降解活性氧。若活性氧的产生量超过机体自身 的清除能力，会同时破坏机体抗氧化酶，通过脂质氧化、分解DNA、和蛋白变 性等损伤细胞。肾移植过程中移植肾不可避免遭受缺血再灌注损伤，其中主要 为氧化应激损伤。肾脏冷保存时组织缺氧，移植恢复血液灌注后即激活瀑布式 的炎症反应，产生大量活性氧。移植后活性氧的增加可能还参与了慢性移植肾 肾病的发生。活性氧导致的线粒体肿胀，凋亡蛋白酶--3的激活，直接引起细胞 坏死或凋亡。在肾脏缺血再灌注损伤后的第一个24小时内，抗凋亡蛋白Bcl．2 曲小管的表达均增加，并且与损伤严重程度相关。抗氧化剂治疗能减轻氧化应 激，抑制细胞凋亡和坏死，改善移植物保存效果，减轻相关的损伤和炎症反应。 中文摘要 体膜复合物。人体左卡尼汀的主要生理作用是辅助长链脂肪酸转运到线粒体内 部进入D氧化循环，做为一种营养添加剂已应用30余年。左卡尼汀对。肾组织的 保护作用已经在多种氧化应激模型中得到证实，如：顺铂导致的肾或小肠损伤 模型，庆大霉素引起肾毒性模型，肾的缺血再灌注模型以及慢性肾衰模型。左 卡尼汀能抑制。肾脏缺血再灌注损伤巾血清和肾组织MDA的生成。有学者发现左 卡尼汀有清除DPPH、超氧阴离子、过氧化氢的能力，提高抗氧化酶的活性，如 SOD，CAT和GPx等，并能降低肾组织巾的MDA浓度。 根据以上的发现，本研究应用人体近曲小管上皮细胞HK．2作为细胞模型， 研究左卡尼汀抗氧化作用的分了机制。作为活性氧的主要成员，过氧化氢在氧 化还原过程中产生，被认为是引起细胞内信号传递的信使。过氧化氢能引起脂 质过氧化和DNA损伤。因此，我们应用过氧化氢诱导HK．2细胞氧化应激，验 证使用左卡尼汀预处理能减轻过氧化氢对HK．2的氧化作用。在此基础上，我们 还进一步研究了左卡尼汀在氧化应激中ROS的生成，脂质过氧化、抗氧化系统、 线粒体功能和细胞凋亡情况。