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微胶囊固定化高密度培养重组盘基网柄菌 1 2 1，2* 1，2 1 1 徐宝多 靳璐 卢英华 李清彪 邓旭 何宁 1 2 （ 厦门大学化学工程与生物工程系，厦门 361005; 厦门大学福建省化学生物学重点实验室, 厦门 361005) 摘 要 制备了液芯羧甲基纤维素钠－海藻酸钙(CMC －ALG)微胶囊，并以该微胶囊固定化培养重组盘基网 柄菌(Dictyostelium discoideum)AX3-Lu8，考察了CMC、CaCl2 和海藻酸钠(SA)对盘基网柄菌生长的影响， 比较了微囊化培养与悬浮培养过程中的细胞密度及葡萄糖消耗速率。经过二次批次连续培养，最大微胶囊 固定化细胞密度达到1.24×108 mL-1，为游离培养的8－10 倍。 关键词 CMC －ALG 微胶囊 固定化 培养 盘基网柄菌 Cultivation of Immobilized Dictyostelium discoideum in CMC-ALG microcapsule for high cell density 1 2 1,2* 1,2 1 1 Xu Baoduo Jin Lu Lu Yinghua Li Qingbiao Deng Xu He Ning (1 Department of Chemical and Biochemical Engineering, Xiamen University, Xiamen 361005, China; 2 Key Laboratory for Chemical Biology of Fujian Province, Xiamen University, Xiamen 361005, China) Abstract A liquid core CMC-ALG microcapsule was used to immobilize recombinant Dictyostelium discoideum AX3-Lu8. The effects of CMC, CaCl2 and SA concentration on the growth of immoboilized D. discoideum in the microcapsule were investgated. The cell growth rate and the consumation rate of glucose of microencapsuled cells were compared with suspension culture. The highest cell density in microcapsule reached 1.24 ×108 mL-1, which was 8-10 times higher than that of in suspension culture. Key words CMC-ALG microcapsule immobilization Cultivation Dictyostelium discoideum 引 言 近年来，在悬浮培养中单细胞生长的盘基网柄菌阿米巴变形虫已发展成为一个前景广阔 的表达重组蛋白的真核表达系统。但是在无菌的（液体）复杂培养基培养盘基网柄菌时，低 的生长速度（代时为8-10 h）和低的最大细胞密度（2×107mL-1）严重限制了其应用[1]。 若盘基网柄菌可以合理的生长速度并以高的细胞密度培养，显然对于相当数量的高经济价值 产品如异源蛋白的生产，将是一大优势。目前对高密度培养盘基网柄菌所作的研究工作不多， 主要是从两方面着手，一是改进培养基组成，设计适合其生长的高密度培养基[2-7]；二是 通过多孔玻璃、浮石等无机多孔载体固定化盘基网柄菌的方法[8-10]；此外卢英华等人还报 道了利用微孔过滤方法截流细胞人为提高细胞密度以生产人类Fas 配体[11]。迄今为止，尚 未见到微胶囊化培养盘基网柄菌的文献报道。 本文采用液芯羧甲基纤维素钠－海藻酸钙(CMC－ALG)体系[12]固定化培养盘基网柄菌