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微波破碎细胞的机理及其在天然产物提取中的应用 刘传斌李宁白风武 1601 (大连理工大学生4C,程研究所，大连12) 苏志国 (中国科学院化工冶金研究所生化工程国家重点实验室，北京100080) 摘要：微波破碎细胞技术是基于微波加热的选择性． 瞬时性和高鼓性．通过对生斩材料进行适宜的微波处 理而实现细胞破碎的一种细胞破碎手段．实战表明， 谊技术尤其适用于胞内小分子产物的提取，在无毖产 物提取分离中具有广阔应用前景． 关冀词：微波破碎细胞机理天然产物提取 1．引言 自然界丰富的生物资源为人类提供了数万种的天然产物，它们是药物、香料、食品添加剂等精 细化学品的重要来源。天然产物的开发应用，首先需要把它从生物体内提取出来。天然产物的提取， 工业上仍普遍采用传统的浸取操作，费时费力．效率低．技术水平落后“一，”。～方面，浸取操作 在提取前没有进行细胞破碎，细胞壁和／或细胞膜带来很大的提取阻力，提取时闻长；另外，浸取操 作不能使胞内水解酶迅速失活．反而由于缓慢升温促进了酶对目标产物的降解，珍贵的原料资源没 有被充分利用。所以．提取时间长和收率低是困扰胞内天然产物提取的关键问题之一。目前，人们 正积极从事天然产物提取新技术的研究，如超临界萃取“’、超声波提取o，、微波强化萃取“，等。 从动力学角度考虑，细胞壁和／或细胞膜的通透性是限制天然产物提取速率的关键因素，故细 胞破碎后，将大大加速天然产物的提取。现有高速珠磨和高压匀浆等细胞破碎方法可以实现目标产 物的快速释放，但在释放目标产物的同时．胞内水解酶一起被释放出来。释放后的水解酶和目标产 物相遇，造成目标产物的损失。而且提取液中含有大量蛋白质等杂质．加重了后续分离纯化的负担。 故上述细胞破碎方法都不适合天然产物的提取。因此．研究专门适合生物小分子提取的细胞破碎方 法，对于天然产物的研究开发具有重要意义。我们针对天然产物一般热稳定性好的特点，将微波技 术用于细胞破碎．建立了一种适台生物胞内小分子提取的细胞破碎技术——微波破碎细胞”，。 微波破碎细胞是基于微波加热的选择性、瞬时性和高效性，控制适宜的微波条件而实现的。微 波破碎后的细胞，由于减小了提取阻力．其胞内小分子物质的溶出变得非常容易，可大大缩短提取 时间。此外，微波处理还能使胞内目标产物的水解酶失活．避免提取过程中目标产物的降解。因此， 我们提出了“微波破细胞提取”的概念．并成功地进行了酵母胞内海藻糖及药用植物高山红景天愈 伤组织中红景天甙的提取n，。本文首先以酵母细胞为例阐明微波破碎细胞的机理，然后，通过实例 对比说明微波破细胞提取技术的优越性。 2．酵母细胞微波破碎的机理 2．1微波加热的特点 MHz至300 微波是一种频率由300 GHz的高频电磁波，它具有电磁波的诸如反射、透射和干涉、 衍射、偏振、以及伴随着电磁波的能量传输等波动特性，而且可用于加热。微波是通过使微波场中 的极性分子或偶极子的快速摆动产生类似摩擦的作用而获得能量，给介质加热的。微波加热具有很 好的选择性，不同物料由于其介电性质不同，在微波场中的受热特性有很大的差别。水及阴阳离子 等能被微波迅速加热，而玻璃、聚四氟乙烯等则是对微波透明的，不吸收微波能．从而不能被微波 加热。此外．微波加热高效快速，易于实现连续化、自动化。鉴于微波技术的上述特点，微波在食 品干燥、灭菌、膨化等领域已获得广泛的工业应用。 364 2．2微波场中酵母细胞的局部受热 酵母菌具有典型的细胞结构，由细胞壁、细胞膜、细胞核、液泡、线粒体和细胞质等构成．酵 母细胞的原生质中含有一个或多个太小不等的液泡．液泡直径为0_3．3um。在静止生长期的细胞中 特别明显，常为最大的细胞器。当细胞在营养培养基中开始出芽时，太的液泡被挤压分成两个小的 液泡，芽形成时，液泡被分配到母细胞和子细胞中。出芽完毕后，小的液泡重新结合或融合而形成 大的液泡。 由微波加热原理可知，正、负离子和水等极性物质对微波的吸收能力比较强，而非极性物质几 乎不吸收微波。由于酵母细胞具有典型的细胞结构．在细胞不同部