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急性犬瘟热引起小袋虫病性肠炎4 · Acute BalantidiasisEnteritisCaused Canine by Distemper 潘耀谦龙塔程相朝董发明刘志军 (河南科技大学，动物科技学院，洛阳，471003) 摘要在对犬瘟热性腹泻进行病理组织学检查过程中，发现两例肠炎主要是由小袋虫引起。 小袋虫主要存在于病犬的空肠和回肠黏膜的上皮细胞间以及固有层内，在脱落的肠上皮细胞 和破坏的肠绒毛所形成的黏液内，也能检出大量的小袋虫。小袋虫的虫体主要有两种，即包 囊体和滋养体。包囊体多呈圆形，胞浆致密、深染，经PAS染色，在其胞浆中可发现大量深 红色的粗大颗粒。滋养体多呈椭圆形，其胞质疏松，着色较淡，PAS染色时，其胞浆中有少 量呈红色的粗大颗粒。用抗犬瘟热病毒核衣壳蛋白抗体染色检查，在小肠黏膜上反、隐窝的 腺上皮、浸润在肠黏膜固有层的淋巴细胞、巨噬细胞和集合淋巴结的树突状细胞均呈强阳性 反应。据此，作者认为小袋虫性肠炎是在犬瘟热病毒引起肠黏膜抵抗力降低的基础上发生的。 关键词犬瘟热，小袋虫病，肠炎，组织病理学 犬瘟热是犬易患的一种严重的病毒性疾病，发病率和死亡率均很高。犬瘟热病毒是一种 泛嗜性、单股RNA病毒，属于副粘病毒科，并与麻疹病毒有密切的关系“。3’。感染犬的临床 症状主要表现为胃肠道病状和呼吸道症状，并常常发展为中枢神经的机能紊乱，而出现一系 列表现不同的神经症状。过去。在犬瘟的病理学研究方面，人们的注意力主要集中在中枢神 经的损伤件”及免疫机能障碍等的研究(II-IO)而对胃肠道炎性变化的发生研究较少。作者在 对10条被临床及免疫血清学诊断为急性犬瘟热病的病例，进行了剖检和胃肠道的病理组织 学观察，从中发现6条临床上有腹泻的病犬，其中两例在镜检时发现严重的小袋虫的感染， 一例则发生了小袋虫与其他病原的混合感染。经联网检索，至今尚未发现犬瘟热继发小袋虫 病的报道，故将检查结果做一报道。 1．材料与方法 本实验检剖检了lO只患急性犬瘟热病的病犬。根据临床症状、抗犬瘟热病毒血清学检 查和病理变化，这些病犬被诊断为患有急性犬瘟病(见表1)。 剖解前，先用棉棒从病犬的眼角和鼻腔粘取分泌物做涂片，HE染色后进行脱落细胞的 包涵体检查。剖检时对全身各组织和器官进行了详细的检查，之后，分系统采取不同的器官 和组织，用10％中性福尔马林液固定。消化系统分别采取了胃、十二指肠、空肠、回肠和结 肠。 固定后的组织经石蜡包埋切片后，分别用常规方法进行了髓染色和PAS染色。为了进 一步确定本病是否由犬瘟热病毒所致，同时观察犬瘟热病毒在胃肠道内的分布及引起胃肠道 的损伤情况，切片还用抗生物素过氧化物酶抗标记的抗犬瘟热病毒核衣壳蛋白单进行染色。 其主要操作步骤如下：切片脱蜡，梯度入水，放入蒸馏水中备用；将切片移入3％甲醇过氧 化氢水溶液中在室温下作用lO分钟；将切片移入柠檬酸缓冲液中在高压灭菌器中(120℃) 处理20分钟；在切片上滴加正常的山羊血清来封闭非特异性的结合位点。将一抗滴加在切 片上，在4℃冰箱中孵育48小时；在充分洗涤的切片上滴加二抗，在室温中作用5分钟； 充分洗涤的切片，用DAB显色；用苏木素做核复染，脱水和封固。在染色过程中每经不同的 染色步骤时，必须用中性磷酸盐缓冲液充分洗涤，之后，才能继续进行下一步的染色。 病例 月龄 性别 品种 腹泻 神经症状 血清检测 诊断 l 2 雄性 杂种犬 有 无 阳性 犬瘟热 2 2 雄性 来波犬 有 有 阳性 犬瘟热 3 4 雌性 比格犬 有 有 阳性 犬瘟热 4 3 雄性 比格犬 无 有 阳性 犬瘟热 5 4 雌性 杂种犬 无 有 阳性 犬瘟热 6 6