电离辐射对肿瘤细胞SCC25表面NKG2D配体表达的-国际肿瘤学杂志.PDFVIP

国际肿瘤学杂志２０１７年８月第４４卷第８期　ＪＩｎｔＯｎｃｏｌ，Ａｕｇｕｓｔ２０１７，Ｖｏｌ４４，Ｎｏ８ ５·６１ · ·论著· 电离辐射对肿瘤细胞ＳＣＣ２５表面 ＮＫＧ２Ｄ配体 表达的影响及对肿瘤细胞的杀伤作用 苗娜娜　涂文勇　孔月虹　王旭　徐璇丽 　　【摘要】　目的　探讨电离辐射对口腔鳞状细胞癌细胞ＳＣＣ２５表面ＮＫＧ２Ｄ配体表达的影响及其对 肿瘤细胞的杀伤作用。方法　ＳＣＣ２５细胞培养至对数生长期时，通过抽签的方式完全随机设计为对照 组（未作处理）和实验组（２Ｇｙ电离辐射处理）。对照组和实验组细胞培养２４ｈ后，流式细胞术检测 ＳＣＣ２５表面ＮＫＧ２Ｄ配体主要组织相容性复合体 类链相关分子（ＭＩＣ）Ａ、ＭＩＣＢ、ＵＬ１６结合蛋白 Ⅰ （ＵＬＢＰ）１的表达量。实验组和对照组细胞培养２４ｈ后，实时荧光定量ＰＣＲ（ＲＴＰＣＲ）法检测ＳＣＣ２５细 胞表面ＮＫＧ２Ｄ配体ｍＲＮＡ表达的变化；制备细胞，将细胞分为空白对照组（ＮＣ）、２Ｇｙ电离辐射（Ｒ）组、 ＮＫ１组（效靶比为５∶１）、ＮＫ２组（效靶比为２０∶１）、ＮＫ１＋Ｒ组（效靶比５∶１，２Ｇｙ电离辐射）、ＮＫ２＋ Ｒ组（效靶比２０∶１，２Ｇｙ电离辐射），各组细胞培养２４ｈ后，细胞增殖毒性试验（ＣＣＫ８）法检测电离辐 射和自然杀伤（ＮＫ）细胞对口腔鳞状细胞癌ＳＣＣ２５细胞的杀伤能力。结果　流式细胞术结果显示， ＮＫＧ２Ｄ配体ＭＩＣＡ对照组和实验组的荧光值分别为２１．０４±０．３９、２２．９０±０．４０（ｔ＝２．４６５，Ｐ＝０．０６９）， ＭＩＣＢ荧光值分别为２７．５８±０．５０、２９．８３±１．０５（ｔ＝１．９３６，Ｐ＝０．１２５），ＵＬＢＰ１的荧光值分别为２１．０４± ０．４０、２１．７８±０．５０（ｔ＝１．１５４，Ｐ＝０．３１３），表明ＳＣＣ２５经过电离辐射后，其表面 ＮＫＧ２Ｄ配体 ＭＩＣＡ、 ＭＩＣＢ、ＵＬＢＰ１的表达量稍有上升，但差异无统计学意义。ＲＴＰＣＲ显示，ＭＩＣＢ、ＵＬＢＰ１ｍＲＮＡ表达对照 组和实验组差异均有统计学意义（ｔ＝１８．３３４，Ｐ＝０．０００；ｔ＝６．３８１，Ｐ＝０．００８），实验组的表达量分别是 对照组的６．４９、１．６４倍；ＣＣＫ８结果显示，ＮＫ１、ＮＫ２组和ＮＣ组相比，细胞杀伤能力的差异有统计学意义 （Ｆ＝３４４．６００，Ｐ＝０．０００），表明ＮＫ细胞可以明显杀死肿瘤细胞，且提高ＮＫ细胞与ＳＣＣ２５的比例后杀 伤作用更强。Ｒ组和ＮＣ组相比，细胞杀伤能力差异无统计学意义（Ｐ＝０．５６７），ＮＫ１＋Ｒ组和ＮＫ１组相 相比，差异无统计学意义（Ｐ＝０．９１５），ＮＫ２＋Ｒ组和 ＮＫ２组相比，差异亦无统计学意义（Ｐ＝０．６７８），表 明电离辐射杀伤作用不明显。结论　电离辐射可以使ＮＫＧ２Ｄ配体ＭＩＣＢ、ＵＬＢＰ１的ｍＲＮＡ表达增强， 可能为肿瘤的免疫治疗提供新的途径。电离辐射对细胞的杀伤作用不明显，可能与辐射剂量低且细胞 仅培养２４ｈ有关。 　　【关键词】　辐射，电离；杀伤细胞，天然；ＮＫＧ２Ｄ配体 ＥｆｆｅｃｔｏｆｉｏｎｉｚｉｎｇｒａｄｉａｔｉｏｎｏｎｔｈｅＮＫＧ２ＤｌｉｇａｎｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｎｔｈｅｔｕｍｏｒｃｅｌｌＳＣＣ２５ｓｕｒｆａｃｅａｎｄｔｈｅ ｋｉｌｌｉｎｇｅｆｆｅｃｔｏｎｔｕｍｏｒｃｅｌｌｓ　ＭｉａｏＮａｎａ，ＴｕＷｅｎｙｏｎｇ，ＫｏｎｇＹｕｅｈｏｎｇ，ＷａｎｇＸｕ，ＸｕＸｕａｎｌｉ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆ ＯｒｏｍａｘｉｌｌｏｆａｃｉａｌＨｅａｄａｎｄＮｅｃｋＯｎｃｏｌｏｇｙ，ＮｉｎｔｈＰｅｏｐｌｅ′ｓＨｏｓｐｉｔａｌＡｆｆｉｌｉａｔｅｄｔｏＳｈａｎｇｈａｉＪｉａｏｔｏｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ＳｃｈｏｏｌｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２００００１，Ｃｈｉｎａ Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ：ＴｕＷｅｎｙｏｎｇ，Ｅｍａｉｌ：ｔｕ４ｙｏｕ＠１６３．ｃｏｍ 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　ＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｉｏｎｉｚｉｎｇｒａｄｉａｔｉｏｎｏｎｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＮＫＧ２Ｄ ｌｉｇａｎｄｏｎｔｈｅｓｕｒｆａｃｅｏｆｏｒａｌｓｑｕａｍｏｕｓｃｅｌｌｃａｒｃｉｎｏｍａｃｅｌｌｌｉｎｅＳＣＣ２５ａｎｄｉｔｓｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙｔｏｔｕｍｏｒｃｅｌｌｓ． Ｍｅｔｈｏｄｓ　ＷｈｅｎＳＣＣ２５ｃ