第一章 蛋白质化学 第一节~第六节（胡疆）.ppt

二、蛋白质的分离纯化 （四）吸附层析 硅胶、氧化铝、活性炭 吸附力的强弱不同 非极性吸附剂：范德华力和疏水相互作用 极性吸附剂:离子键、氢键 二、蛋白质的分离纯化 （五）亲和层析 二、蛋白质的分离纯化 1、透析、超滤 根据性质：分子大小 2、盐析（salting out） 根据性质：蛋白质的沉淀 作用机理：中性盐中和表面电荷，破坏水化层 影响因素：表面电荷、水化层、溶剂性质 3、电泳： 根据性质：蛋白质的两性解离 作用机理：异性电荷互相吸引 影响因素：电荷种类及数量、分子大小及形状、溶液离子强度及pH等 4、层析 （1）离子交换层析：电荷、分子量、分子形状 （2）亲和层析：生物特性 （3）吸附层析：吸附特性 （4）分子筛（凝胶过滤层析）：分子大小及形状 大分子先洗脱下来 5、超速离心：分子大小及形状、溶液特性 4、空间构象并非生物活性的唯一影响因素 【举例】低温下酶活性低，但并不影响构象；盐析时沉淀的酶无活性，但构象不变。 5、蛋白构象疾病：错误构象相互聚集，形成抗蛋白水解酶的淀粉样纤维沉淀，产生毒性而致病。 老年痴呆 疯牛病 亨汀顿舞蹈病 1、蛋白质的变性与复性 去除部分变性剂 温和复性 温和复性 天然蛋白 （具有正确的一级结构和高级结构，因此具有生物活性） 变性蛋白 （具有正确的一级结构但无高级结构，无生物活性） 变性环境 非天然蛋白 （具有正确的一级结构和错误的高级结构，无