蝴蝶兰叶片蛋白质提取及双向电泳体系优化.pdfVIP

玉州 档静辫 2014,433()：206—211 蝴蝶兰叶片蛋白质提取及双向电泳体系优化 朱小姝，叶庆生 (华南师范大学 生命科学学院，广东 广州 510631) 摘 要：通过对蛋白质提取、IPG胶条选择、上样量、水化方式、聚焦条件等方面的优化，建立蝴蝶兰叶片蛋 白质的双向电泳体系。结果表明，采用酚抽提法提取蝴蝶兰叶片蛋白质的纯度较高，复溶较完全；双向电泳优 化体系选用24cmpH3～10NL的IPG胶条，被动水化，上样量为 1．35mg，B1程序进行等电聚焦，12％分离 胶进行第二向电泳，考马斯亮蓝G．250染色。该方法获得分辨率较高、重复性较好的蝴蝶兰叶片双向电泳图谱， 蛋白数点多达 1163个，可以满足蝴蝶兰蛋白质组学研究和分析。 关键词：蝴蝶兰；叶片；双向电泳；蛋 白质 Doi：10．3969~．issn．1009—7791．2014．03．005 中图分类号：$682．31；Q512 文献标识码：A 文章编号：1009．7791(2014)03-0206．06 OptimizationofProteinExtractionandTwo—dimensi