黄海黄杆菌YS—9412—130低温碱性蛋白酶活性必需基因分析.pdfVIP

维普资讯 第 23卷 第 3期 海 洋 水 产 研 究 VO1．23，NO．3 2 0 0 2 年 9月 M ARINE FISHERIES RESEARCH Sept．，2002 文章编号 ：1000—7075(2002)03—0026—04 黄海黄杆菌 YS一9412—130低l：日 碱性蛋 白酶活性必需基团分析 洪义 国 孙 谧 修朝 阳 张云波 王海英 王跃军 (中国水产科学研究院黄海水产研究所 ，青岛 266071) 摘要 用化学修饰法结合酶 的紫外吸收光谱变化研究黄海黄杆 菌 YS一9412—13O分泌 的海洋低温 蛋 白酶的功能基 团性质 ，结果表 明，羟基、味唑基 、E一氨基及胍基均与酶活性有关，而羧基、巯基与酶活 性无关。酶的性质与丝氨酸 蛋 白酶有很大 的相似性 。 关键词 海洋低温碱性蛋 白酶 必需基团 中图分类号 ：Q55 文献识别码 ：A Analysisoffunctionalessentialgroupsofmarinelow。-temperature alkalineproteasefrom Flavobacterium yellowseaYS—-9412--130 HONG Yi—guo SUN M i XIU Zhao—yang ZHANG Yun_bo WANG Hai—ying W ANG Yue—jun (Yellow SeaFisheriesResearchInstitute，Qingdao266071) ABSTRACT Thecharacteroffunctionalessentialgroupsofmarine low—temperaturealka line proteasefrom Flavobacterium yellowsea YS——9412——130 wasstudied with chemicalmodify andultravioletabsorbmethod．TheresultshowsthatSer，His，Lys，Argarecloselyrelatedto theactivityoftheenzyme．Butcarboxylandsulfhydrylhavenorelationwiththeactivityofthe enzyme．Thecharacteroftheenzymeissim ilartoSerineprotease． KEY W ORDS Marinelow—temperaturealkalineprotease Essentialgroup 应用化学修饰法改变酶分子侧链基 团、探讨功能基 团的性质，是研究酶活性必需基团的重要手段之一。前 文报道从黄海黄杆菌YS一9412-130中提取能水解酪蛋 白的海洋低温碱性蛋 白酶，经 电泳鉴定为单一纯酶制剂 (孙 谧 2001；王跃军 2001)。本文在以上研究的基础上，进一步探讨 了与该酶催化活力有关的必需基 团，进 而获得有关该酶结构与功能关系的有益资料，为该酶的开发利用打下 良好的基础 。 1 材料与方法 国家 “863”项 目(863—819一O6一O1)资助 中国科学院上海生物工程研 究中心 ，上海 200233 收稿 日期 ：2001—10—17；接受 日期：2002—08—17 维普资讯 第 3期 洪义 国等 ：黄海黄杆菌 YS一9412—13O低温碱性 蛋 白酶活性必需基 团分析 27 1．1 材料 海洋低温碱性蛋 白酶按前文方法提纯 (王跃军 2001)；酪蛋 白(Cas