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无偿献血人群中抗-HBC检测的应用价值
精品论文 参考文献
无偿献血人群中抗-HBC检测的应用价值
赵桂红 (大连市血液中心 辽宁大连 116001)
【中图分类号】R446.11【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2013)02-0122-02
乙型肝炎是由乙型肝炎病毒引起的全球性传染病。不同地区、不同年龄HBV感染的流行强度差异很大。目前临床检测乙型肝炎病毒感染最常用的方法为酶联免疫吸附试验(ELISA)。我国采供血机构主要采用检测HBsAg来筛查乙型肝炎病毒携带者,但HBsAg检测受病毒载量、“窗口期”、病毒变异等多种因素影响。研究表明,部分HBsAg阴性、抗HBc阳性血液仍有传播HBV的危险。隐匿性感染是目前临床常见的HBV感染,隐匿性HBV感染者献血而导致受血者感染HBV或引起肝炎的病例时有报道。NAT是目前检测隐匿性HBV感染的主要手段,但其高昂的价格以及混浆检测时敏感性的降低使得其很难在发展中国家推广使用。因此,采用成本低、检测率高的抗-HBC的检测是有必要的。
本实验采用电化学发光法检测5378份样本的HBsAg,Anti-HBs,Anti-HBc,HBeAg,Anti-HBe,Anti-HBc IgM,然后结合调查问卷与献血者的基本信息,探讨Anti-HBc检测在献血者筛查中的应用价值。现将结果报告如下。
一、材料与方法
1.标本的来源和采集处理
1.1标本的来源 2012年5月31日至2012年7月15日,大连市18~55周岁无偿献血者中经体检合格并填写调查问卷的健康献血者血液样本5378份。
1.2标本的采集和处理 静脉采血至酶免管(EDTA抗凝的无分离胶的负压真空管)和核酸管各5ml,充分混匀,置于2℃~8℃保存。
2.主要试剂
2.1常规ELISA筛检试剂
乙肝表面抗原检测试剂:厦门新创、美国雅培。
2.2核酸检测试剂
罗氏:cobasreg; TaqScreen MPX Test
诺华:Procleix Ultrioreg; Assay,Procleix HBV Discrimination
2.3电化学发光试剂
罗氏:HBsAg,Anti-HBs,Anti-HBc,HBeAg,Anti-HBe,Anti-HBc IgM
3.主要仪器 全自动酶免分析系统FAME 24/20(瑞士哈米顿公司)、全自动样本处理机Microlab AT plus 2(瑞士哈米顿公司)、核酸混样仪Microlab Star(瑞士哈米顿公司)、自动化核酸检测仪Cobas Ampliprep amp; Cobas TagMan(美国罗氏公司)、自动化核酸检测仪Procleix Tigris System(美国诺华公司)、电化学发光检测仪Cobas e 411(美国罗氏公司)
4.实验方法
4.1检测 5378份样本进行电化学发光技术进行检测,同时进行常规的酶免与核酸检测。
4.2电化学发光检测操作 严格按照电化学发光检测仪Cobas e 411的操作说明书进行实验操作。采用电化学发光法测定血清学乙肝三项HBsAg,Anti-HBs,Anti-HBc。对检测结果为Anti-HBslt;200(IU/L)、HBsAg(-)、Anti-HBc(+)的样本进行HBeAg、 Anti-HBe和Anti-HBc IgM的测定。
5.数据处理
将采用电化学发光法检测结果录入表中。将检测到的数据结合调查问卷及献血者的基本信息,比较不同地区、不同出生年月是否注射过乙肝疫苗之间的差异,进行 检验,观察结果是否具有显著差异。
二、结果
1.5378份标本的血清学乙肝三项HBsAg,Anti-HBs,Anti-HBc的电化学发光检测结果,见表1,并对Anti-HBsblt;200(IU/L)、HBsAg(-)、Anti-HBc(+)的样本HBeAg,Anti-HBe,Anti-HBc IgM的测定,见表2。
表1 5378份样本电化学发光结果
模式 HBsAg Anti-HBs(IU/L) Anti-HBc 标本数 比例(%)
1 - lt;200 + 676 12.57
2 - lt;200 - 967 17.98
3 - gt;200 + 746 13.87
4 - gt;200 - 2989 55.58
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