电穿孔对海藻糖载入人红细胞的作用研究.pdfVIP

第九届全国冷冻干燥学术交流会中国上海2008年12月6．7日 电穿孔对海藻糖载入人红细胞的作用 刘建峰1周新丽1周国燕1郭柏松2 (1上海理l：大学低温生物与食品冷冻技术研究所，上海200093， 109) 2上海东富龙科技股份有限公司 冻干工艺研究室上海201 摘要海藻糖是一种有效的冻干保护剂，但其为非渗透性的二糖，无法自由进入细胞内 部，起到很好的保护作用。一直以来人们采用多种办法使其载入细胞内部，但是效果一直不 佳。电穿孔作为一种很好的物理方法，可以将不可渗透性的外源分子载入细胞内部且不伤害 细胞，它在转基因、遗传方面有着广泛的应用。我们采用此方法将海藻糖载入红细胞内部， 通过正交实验，分析出细胞外海藻糖浓度、电脉冲的频率、电压、脉宽等因素对海藻糖载入 效果的影响程度。并且找到了最佳的电脉冲条件：细胞外海藻糖浓度为800mM、电压为300v， 脉宽1ms、频率为4次／min。此条件下，细胞内的海藻糖浓度可以达到63．68mM。 关键词电穿孔：红细胞；海藻糖；冷冻干燥 Effectof on trehaloseinto electroporationloading Humanredbloodcells 1 1 1 2 Liu ZhouXinli 7_,hou Guo Jianfeng Guoyan Baisong (1Institute0f andfood ofScienceand Cryobiology refrigeration，ShanghaiUnive培ity Lab TofflonScienceand Technology，200093，Shanghai，2LyophylizationShanghai technology Co．，201109) iSaneffective itisnot tothemembraneand Al?stract’I’他haloselyoprotectant,butl建rmeable isdifficulttoenterthecells．Researchershadtrieda 0f toloadthetrehaloseintothe ways variety resultis the not a load cells,but methods，Can good．Electroporation，asgoodphysical substanceintocellsanddolittleharm been usedsome impermeable tothecells．Ithas widelyin as usedthismethodtoloadtrehaloseint0redblood fields，suchtransgenic，geneticaspects．We cells factorsthatinfl