电穿孔对人红细胞物理和生物活性的影响研究.pdfVIP

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2018-01-04 发布于湖南
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电穿孔对人红细胞物理和生物活性的影响研究.pdf

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第九届全国冷冻干燥学术交流会中国上海2008年12月6-7日电穿孔对人红细胞物理和生物活性的影响刘建峰周新丽周国燕刘宝林 ( 上海理工大学低温生物与食品冷冻技术研究所，上海200093) 摘要：电穿孔是一种可以将非渗透性的外源分子载入细胞内部且不伤害细胞的物理方法，它在转基因、遗传、细胞融合等方面有着广泛的应用。我们采用此方法将海藻糖载入红细胞内部。取得了较好的载糖效果，使细胞内的海藻糖浓度达到63．68lllM，而经过电脉冲后同等海藻糖浓度未加电穿孔时的溶血率为15％，所以有电穿孔引起的溶血仅为14％左右；而电穿孔后，细胞内酶的活性差别较大：SOD酶呈明显的下降趋势，G6PD的活性变化不是明显，而ATPcase却是呈现出增加的趋势，此外我们通过对酶活性的测定还证明了细胞内的海藻糖对细胞内酶活性具有保护作用。关键词：冷冻干燥；溶血率；海藻糖；．电穿孔；酶活性 Effectof on and ElectroporationPhysicalBiological ActivitiesofHumanRedBloodCells Liu ZhouXinliZhou LinBaolin Jianfeng Guoyan (Instituteof andfood of Scienceand Cryobiologyrefrigeration，ShanghaiUniversity Technology， 200093，Shanghai) isa methodswhich Abstract：Electroporation Canload physical non-permeableforeign elementsintocellsbutnoharmful．Ithasbeenusedin andcellfusionfileds transgenic，genetic thismethodhavemadea resultin trehaloseintohumanred widely．weadopting good loading blood concentrationoftrehalosecan to cells，ne reached63．68mM，butthemiddleosmotic isalsotheNaCIconcentrationatwhichtheredbloodcellsis50 ofthe fragilityOt percent 3．32 after lower than hemolysis)isonly g，“．019／L norraal；the Electroporation，Slightly largest 300 1 concentration，800 hemolysi