电脉冲的生物效应及其在基因治疗上的应用研究.pdfVIP

电脉冲的生物效应及其在基因治疗上的应用 —，——-’I——一 徐宝强袁其平童峥嵘王德会刘建民苏明皓 天津理工大学光电信息与电子工程系天津300191 摘要：本文介绍电穿孔的基本理论，重点介绍基因脉冲导入仪系统组成，以及探讨其在 基因治疗方面的应用。 关键词扩电穿孔：基因脉冲导入仪；基因治疗； ，酶守 EfiectiveofElectric and Biology Impulse its totheGene Application Therapy Xu Dehui，LiuJianmin，Su Baoqiang，YuanQiping，TongZhengrong，Wang Minghao ofOptic—electronic．TianjinUniversity Deparlment ofTechnology Abstract：Thisintroducedthe oftheelectrofusion．Itdescribedthe paper principle mainly constitutionofGeneTransfectionInstrumentandits tothe applicationgenetherapy． Transfection Instrument，Gene Keywords：Electrofusion，Gene therapy， 1．概述 近年来，国内外众多学者对适当的脉冲电磁场作用下，细胞膜发生电穿孔的现象展 开研究lIj。细胞电穿孔技术利用高压电脉冲使细胞膜发生瞬间的可逆穿孔，对受体细胞 产生的扰动很小，强度适当的电脉冲会使细胞的外壁产生许多“小孔”，此时，溶液中 的基因就会通过这些小孔进入细胞，经过～段时间后，细胞壁将会自动修复，这样就实 现了电脉冲的基因导入。由于细胞电穿孔技术的高效性、低毒性、普适性和可控性，电 穿孔技术已广泛用于遗传工程、细胞工程和基因工程等领域。目前国内外又将电穿孔技 J。 术应用于基因治疗、药物增敏、临床等诸多方面，必将给予人类深远的影响12q 实现细胞电穿孔的关键是能提供可控的高压，大电流脉冲的系统。本文首先介绍电 穿孔的基本理论，重点介绍我们自行研制开发的基因脉冲导入仪系统以及探讨其在基因 治疗方面的应用。 2．基本原理 在细胞电穿孔技术形成与发展过程中，对细胞电磁效应及其机理的研究一直受到关 注。外加电场之所以能够击穿细胞膜，主要是因为细胞膜基本上是一个绝缘体，两面浸 在含离子的电解质溶液中，当even电场时，引起膜两边的电解质离子极化，而形成了外 加的膜电位吒。 若细胞为球形，悬浮在溶液里并处于电场中，如图1所示，因此可以得到外电场诱 导的膜电位表示为 K．=—1．5FE：oa：c：osO Ll，(1) Pm。—F2=2专7 、『1+(拼)‘ 式中：口为细胞半径，矗为外电场强度，0为给定膜位置与电场方向间夹角， ∞为电 场角频率，f为弛豫时间。当外加交流电场频率足够低，即吐玎远小于l时，方程(1) 变为稳态条件下的膜电位：