水稻细胞质雄性不育恢复基因的转化与功能互补实验研究.pdfVIP

摘要 植物细胞质雄性不育((cytoplasmicmalesterility,简称CMS)是一种不 能产生有活力花粉的母性遗传现象，它是细胞质基因遗传且可被显性核恢 复基因 (restorersoffertility,RJ)恢复育性。分离和克隆水稻核恢复基因并 分析其功能，对水稻细胞质雄性不育恢复性分子机理的最终阐明和研究细 胞核与细胞质因子间相互作用有重要的理论和应用价值。把候选基因的克 隆导入植物体内进行基因功能互补实验是克隆新基因并研究其功能的重要 步骤。本研究的目的就是利用农杆菌介导法，将Rfl基因候选克隆导入水 稻细胞质雄性不育系，并鉴定其育性。本研究包括以下内容:①建立高频 再生的水稻细胞质雄性不育系转化体系:②利用农杆菌介导法，将Rfl基 因的候选克隆转入农杆菌EHA105菌株，并用于感染水稻细胞质雄性不育 系的胚性愈伤组织，进行基因互补实验，主要结果如下: 1、将水稻细胞质雄性不育系的成熟种子或幼胚在诱导培养基上诱导 愈伤组织，建立水稻细胞质雄性不育系的高频再生基因转化体系 2、用分子标记01-2和Rflm为探针筛选水稻细胞质雄性不育的恢复 系C9083的TAC基因组文库，获得一个TAC克隆，编号为:A24。抽提 质粒DNA，