反义凝血酶受体ODNs抑制血管平滑肌细胞增殖机制的研究.pdf

反义凝血陇受体抑制血份平滑肌细胞增殖机制的研究 反义凝血酶受体抑制血管平滑肌细胞增殖机制的研究 研究生 肖丽梅 导 师 王启贤副教授 郝萍副教授 摘 要 目的 研究反义凝血酶受体在血管平滑肌细胞增殖中的作用，探讨凝血酶 受体反义序列抑制血管平滑肌细胞增殖机制。 方法 用细胞转染,RT-PCR,West-Blot,H-TdR掺入实验,H一肌醇掺入 实验、E工LSA实验对血管平滑肌细胞的凝血酶受体的表达进行检测和对血 管平滑肌细胞的增殖情况进行检测，确定反义凝血酶受体对血管平滑肌细 胞增殖的影响。 结果 反义凝血酶受体明显抑制血管平滑肌细胞的增殖 (与对照组、正义 组相比，P0.05);明显抑制血管平滑肌细胞的凝血酶受体mRNA和蛋白的 表达:明显抑制了血管平滑肌细胞磷酸肌醇代谢。 结论 凝血酶受体反义序列明显抑制血管平滑肌细胞的增殖，其机制是通 过抑制凝血酶受体基因的表达 (mRNA和蛋白的表达)，抑制细胞内信号传 递来完成。凝血酶在血管病变中的作用有重要意义，为应用反义技术治疗 血管性疾病 (动脉粥样硬化及冠状动脉血管腔内成形后再狭窄)中血管平 滑肌细胞增殖提供理论和实验依据，并为下一步构建反义表达载体治疗血 管性疾病莫定基础. [关键词]血管平滑肌细胞增殖 凝血酶 凝血酶受体 反义技术 动脉 粥样硬化 反义凝血蔺受体抑制血甘平滑肌细胞增班机制的研究 AntisenseSequencesofThrombinReceptorArrestVascularSmooth MuscleCellProliferation Master candidate:Xiao Li Mei Supervisor:Prof.WangQiMan Abstract Purpose thepurposeofstudyistoevaluatemechanism whichantisensesequenceofthrombinreceptorinfluenceVascular SmoothMuscleCal!Proliferation. MeteriaIandmethods CeIItransfaction,RT-PCR.West-Blot,3H-TDR unincorporatedassay,3H-inositolunincorporatedassay,EILSAassay areusedtomeasureVascularSmoothMuscleCal!Proliferationand expression ofthrombin receptor ofVascularSmoothMuscle Cellinordertodetectmechanismofantisensesequenceofthrombin receptorwhichinfluenceProliferationofVascularSmoothMuscle Cal} Result Antisensesequenceofthrombinreceptorclearlyrestrain proliferationofVascularSmoothMuscleCelland mRNAandprotein expressionofthrombinreceptorandmetabolismof3H-inositol.There weregreatlystatisticdifferenceamongthem. Conclusion AntisensesequenceofthrombinreceptorrestrainedSD ratvascularsmoothmusclecellsproliferationmarketedlydueto restraingeneexpressionofthrombinreceptorandsignalinduction. ThrombinreceptorhasimportantroleinProliferationofVascular SmoothMuscleCal!.Thus,itprovidebasisoftheoryandexperiment whichantisensetechnologyma