毛细管电泳一电致化学发光测定诺氟沙星的研究.pdfVIP

维普资讯 第34卷 分析化学 (FENXIHUAXUE) 研究简报 特lf1J 2006年 9月 ChineseJournalofAnalyticalChemistry S135～S137 毛细管电泳一电致化学发光测定诺氟沙星的研究 苏彩娜 康艳辉 邓必阳 (广 曲师范大学化学化T学院，桂林 541004) 摘 要 基于诺氟沙星对联吡啶钉在铂电极 l的电致发光信号有增敏作用 ，与毛细管电泳结合。建 了一·种 测定诺氟沙星的电化学发光分析新方法。研究了T作电檄电位 、磷酸盐缓冲液浓度及其pH值 、进样电』．和 进样时间等实验参数对诺氟沙星测定的影响。在优化的实验条件下，其浓度线性范围为0．02～10tzmol／l； 榆…限(3 )为00048txmol／l；峰面积的相对标准偏差为2．6％(1．0~xmol／1，n=11)。本法可直接用于尿液 中诺氟沙星(NFLX)含量的测定。回收率为92．7％～97．9％，结果满意．． 关键词 毛细管电泳，电致化学发光 ，诺氟沙星，联吡啶钉 引 言 诺氟沙星(Norfloxacin，NFIX)，化学名为 1．乙基．6．氟．1，4．二氢_4．氧代-7．(1．哌嗪基)．3．喹啉羧酸， 属于第3代氟喹诺酮类抗菌药物，具有抗菌谱广、抗菌作用强、副作用小、组织分布较好等药动学特点。 NFLX对细菌呈杀菌作用，尤其对革兰氏阴性菌及绝大多数菌株有较好的抗菌活性_】J。文献报道 NFIX 的分析方法有分光光度法 、荧光法 、高效液相色谱法 J、电分析法 ’及化学发光法 等。电化 学发光分析法具有电化学分析与化学发光分析的优点，把毛细管电泳与电致化学发光结合起来，是…种 高效分离与高灵敏度检测的新方法 “。近年来，毛细管电泳一电致化学发光 (CE—ECL)已在一些胺类药 物及氨基酸等生化物质的检测中得到了广泛应用。而用毛细管电泳(CE)．电致化学发光 (ECL)来测定 NFLX尚未见报道。本研究根据 NFLX能与用电化学方法产生的Ru(bpy)：反应且发光，建立了cE— ECI测定NFLX的新方法 。本法具有灵敏度高、样品用量少等特点，可直接用于人尿中NFLX的测定。 2 实验部分 2．1 仪器与试剂 MPI-B型多参数化学分析测试系统(两安瑞迈电子科技有限公司)；PHSJ-4A型酸度计 (上海精密科 学仪器有限公司)；电化学检测采用三电极系统：直径300 m铂盘电极为T作电极，Ag／AgC1电极为参 比电极，铂电极为辅助电极；未涂层石英毛细管40cm×75txmi．d．(河北永年光导纤维厂)。联吡啶钉 (美曰Alfa公司)；磷酸二氢钠、磷酸氢二钠和乙腈均为分析纯，实验用水为亚沸蒸馏水；诺氟沙星标准 品(中吲药品生物制品检验所，98．9％)用水溶解，配成浓度为50~zmol／L溶液，避光于4 储存备用，使 用时按要求稀释即可。 2．2 实验方法 工作电极每两星期取}十{用0．3 mA1O，粉末重新抛光，在水中用超声波洗净后，于显微镜下将其放 置在正对毛细管出1：3末端处 ，调节两者距离约 300 m。采用 12kV×6s电驱动进样，分离电压为 l5kV。每次使用前用水冲洗5min，再用 15mmol／LpH8．2磷酸盐缓冲液冲洗5nfin。所有溶液在进 入毛细管前须用0．45 m醋酸纤维素膜过滤。ECL池结构与文献[11]巾的设计相似，实验前ECL池中 充满5mmol／LRu(bpy)；和50mmol／LpH8．0磷酸盐缓冲液350IxL，实验3h后更换新鲜ECI_溶液， 以保持实验重现性；光电倍增管的电 设置为+800V。 2．3 尿样处理 取志愿者新鲜尿样 1．O0niL于 l0mLJ离心管巾，加入乙腈 5．00niL，混合，旋涡震荡2rain，以4000 r／min离心5min，取上层清液于25c=【氮气流下吹干，残余物溶于 1．00mL水巾，过滤后滤液用于测定。 20064)1一l3收稿 ；2006-05一l2接受 本：史系国家自然科学堆金(No和广西科学基金 (No．0236014)资助