内蒙古地区肉仔鸡群中鸡毒枝原体感染情况的调查及病原性研究.pdfVIP

中国畜牧兽医学会禽病学分会第十次学术研讨会论文奖 内蒙古地区肉仔鸡群中鸡毒枝原体感染情况的调查 及病原性研究 张建红 王明辉 韩 冰 高阿雪 呐蒙古草原兴发股份有限公司，赤峰,024076) 毕丁仁 (华中农业大学畜牧兽医学院，武汉 430070) 摘要 应用快速平板凝集试验(SPA)检侧了内蒙古地区有代表性的十个肉仔鸡场鸡毒枝原体感染情况，平 均阳性率为52.7%，对部分阳性鸡进行了鸡毒枝原体的分离鉴定.结果分得的15株枝原体有12株为鸡毒枝原体 将其中的一株接种24日龄肉仔鸡进行了病原性研究，结果表明该株鸡毒枝原体对肉仔鸡有很强的致病性 关橄词厂肉仔m 鸡毒枝原体 致病力 枝原体(mycoplasma)是一类缺乏细胞壁的原核生物，在自然界分布极为广泛。目前认为禽类 枝原体一共有28种，其中属于枝原体属24种.无胆幽原体3种以及1种尿原体，最重要的三种为 鸡毒枝原体(MG),滑液囊枝原体M〔S)、火鸡枝原体(MM)，其中对家禽生产危害最大的是鸡毒枝 原体，通常被称为鸡慢性呼吸道病((CRD)和火鸡传染性窦炎，根据冀锡霖等(1986)对全国2。个 省、市、自治区的21个地区的血清学调查，全部被检鸡群中有78.25写感染鸡毒枝原体.即使康复 的鸡仍为带菌者;据广西兽医研究所(1990)报道，MG感染率为500c。白浪等(1983)对某肉仔鸡场 进行抽查，MG的检出率在60肠以上、马凌汉(1982)、张理漠(1983)鲁玉花 1〔996)报道了MG的感 染。郭维柱(1995)等进行了锦州市周围大面积流行CRD的报道，毕丁仁 1〔984)从北京、南宁两地 11个鸡场分离出60多个分离物，对其中的49株按国际枝原体中心规定的方法进行鉴定，结果有 27株为鸡MG,2株MS和其它几种非病原性枝原体，说明主要流行的是MG。为了确定内蒙古地 区肉仔鸡群中鸡毒枝原体的感染情况，鉴定其病原性，进行了本次调查研究 以期为有效的防治该 病提供依据。 1材料与方法 1.1试验材料 1.1.1血清样品 取自内蒙古地区饲养规模不同的十个商品鸡场的肉仔鸡 1.1.2 鸡毒枝原体平板凝集抗原及阳性血清均购自中国兽医药品监察所。 1.1.3培养基 按毕丁仁[[I]介绍的方法配制修改FM-4培养基。醋酸蛇、毛地黄皂昔、四氮哇、精 氨酸等试剂均购自北京市化学试剂公司。 1.1.4 试验鸡 购入24日龄健康AA肉仔鸡20只。 12试验方法 1.2.1选取十个不同饲养规模的商品鸡场，随机抽取950只肉仔鸡采血分离血清，按宁宜宝[z7介 绍的方法进行了鸡毒枝原体血清平板凝集试验。 1.2.2枝原体的分离培养 参考Jordan介绍的方法口，用无菌棉拭子在有临床症状的鸡的鼻汁、 喉头分泌物涂擦，将该拭子接种液体培养基;气管、气囊和肺脏分别取小块接种液体培养基，经4一 5h液体培养基稍变色后，取。.5m1移种于2m1液体培养基中，待变色后接种固体培养基;不变色管 继续培养至变颜色，在24h变色的管移种到液体培养基中，待变色后接种固体培养基;2-3天变色 一 217 一 中国畜牧兽医学会禽病学分会第十次学术研汁会论文集 的管直接接种于固体培养基 固体培养物置37C，含5%CO:和保持一定湿度的条件下培养，3-5天后观察菌落生长情况。 液体培养物加胶塞于37C培养，以培养液的色泽变化判断生长情况。初次接种的培养物视上述不 同情况进行传代，传3代后无生长判为分离阴性。 1.2.3 分离物的特性鉴定 1.2-3.1生物学特性鉴定 新分离物通过。.45pm孔径的滤膜，再接种固体培养基做克隆纯化. 连续重复3次;在不加抗生素和醋酸论的培养基上连续传五代以上，最后接种固体培养基，观察菌 落形态，并进行菌落Dienes染色，以鉴定分离物是否属于细菌L型。取1.5--2ml,0.3%鸡红细胞 悬液注入分离株固体培养物上，37C静置20分钟，倾去悬液，PBS轻洗3-5次至无红色脱落.40 倍显微镜下检查菌落，测定菌落是否吸附红细胞 L2.3.2生化特性鉴定 毛地黄皂昔敏感试验:间接检测分离物对固醇的需求。参照Tul卜的方法进行[F} 四氮哇还原试验:液体培养基中不加酚红，另加0.020a(w八)氯化三苯基四氮哗，接种后1周 培养液从无色透明变为砖红色，对照管不变色为阳性。