杜仲、茯苓配伍对小鼠免疫功能的影响.docVIP

精品论文 参考文献 杜仲、茯苓配伍对小鼠免疫功能的影响 陈喜君 王艺（ 黑龙江大学 1 5 0 0 8 0 ） 【摘要】目的 观察杜仲、茯苓联合作用对小鼠免疫功能的影响。方法 40只小鼠随机分4组，分别为正常对照组（I）、杜仲组（II）、茯苓组（III）及复方组（IV）。灌胃给药后，测定外周血T细胞的表达情况及脾抗体生成数。结果 经统计学分析，与对照组相比，试验组组均能显著升高CD4+及CD4+/CD8+的比值（P＜0.05），但I I组对抗体生成数无明显作用。结论 杜仲对机体的细胞免疫有显著的增强作用，对体液免疫无明显作用。茯苓可显著提高抗体生成量，但CD4+及CD4+/CD8+比值低于杜仲组。茯苓和杜仲联合使用，在体液免疫和细胞免疫两方面增强机体的免疫力，具有增效作用。 【关键词】杜仲 茯苓 配伍 免疫力 杜仲和茯苓均为我国传统中药，已有2000多年的药用历史。杜仲在中药古典《神农本草经》、《本草纲目》中就被列为药之上品[1]。近年来，国内外许多学者对杜仲的化学成分和药理作用进行了大量研究，发现杜仲具有调节血压、降低血糖、抑制肿瘤细胞生长等药理作用。《中国药典》规定其树皮作为中药杜仲入药[2]。茯苓为多孔菌科卧孔菌属真菌茯苓的干燥菌核，多依附松树根生长[3]。该菌是著名而且用途极广的传统中药材，又是著名的食用菌。茯苓性甘、淡、平，人心、脾、肾经。 杜仲和茯苓现已广泛用于提高机体的免疫力，但二者联合使用的研究却未见报道。本研究以CD4+、CD8+的表达情况及脾抗体生成数作为主要观察指标，旨在探讨杜仲和茯苓联合作用对小鼠免疫系统的影响，对二者配伍的合理性进行论证，为临床应用提供理论依据。 1 材料与方法 1.1 动物 清洁级Balb/c小鼠，雄性，6～8周龄，体重18～22g。 1.2 仪器及试剂 FACSCalibur流式细胞仪：美国BD公司，激发波长488nm。裂解液、BSA、叠氮化钠、磷酸缓冲液、Hankrsquo;s、荧光素标记的抗小鼠抗体 PE-CD8+、FITC-CD4+等。 1.3 分组与给药 将40只小鼠，随机均匀分为空白对照组、杜仲单方组、茯苓单方组和杜仲茯苓复方组4组。 表1试验动物分组 1.4 CD4+、CD8+测定 40只小鼠随机分为4组，每只小鼠每日按表1进行灌胃给药，连续7日。摘眼球取抗凝血标本，用Ficoll-Hy-paque淋巴细胞分离液获得外周血单个核细胞，用P B S液洗涤后调整细胞浓度为（1.0～1.5）times;109/L。在1m L单个核细胞溶液中加入F I T C-C D4+单抗和P E-C D8+单抗1mu; L，置4℃冰箱避光孵育1h后用冷P B S液洗涤，10g/L多聚甲醛固定后，用FACSCalibur流式细胞仪进行测定CD4+和CD8+T淋巴细胞含量[4]，并计算CD4+/CD8+比值。 1.5 抗体生成细胞检测 40只小鼠随机分为4组，按表1所示灌胃，连续灌胃25日。第25日，每只小鼠腹腔注射2%SRBC 0.2mL，继续灌胃5d，颈椎脱臼处死小鼠，取脾脏，用镊子轻轻将脾磨碎，以Ha n ks液洗涤3次，用完全1640培养液配成5times;106个/m L细胞悬液备用。用含有0.5m L（45～50℃）表层培养基的小试管中加入50mu;L 10%SRBC及20mu;L脾细胞悬液，迅速混匀，加于挂玻片上，凝固后，将玻片倒放，置CO2孵箱中培养1.5h，加SA缓冲液稀释的补体，继续培养1.5h，计算溶血抗体生成细胞数[5]。 1.6 统计学分析 实验结果采用SPSS 13.0 for windows统计软件进行分析，实验结果用均数plusmn;标准差（Xplusmn;S）表示。 2 结果 连续给药7日后，取外周血用流式细胞仪进行检测后，统计结果如表2。与对照组比较，试验组均能显著提高C D4+及C D4+/C D8+比值（P＜0.05），且复方组与单方组相比，具有显著性差异（P＜0.05）。茯苓组对CD8+值影响不大，CD4+/CD8+比值低于II、IV组。 表2 茯苓、杜仲及两者联合应用对小鼠T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+的影响（Xplusmn;S） 注：与对照组相比，*P＜0.05；与单方组相比，#P＜0.05。 连续给药25日后，测定脾脏中抗体生成细胞数。由表3可知，I I I、IV组能显著提高脾抗体细胞生成数（P＜0.05），II