柴胡皂贰d对肺纤维化小鼠血清SOD的影响及临床研究.docVIP

精品论文 参考文献 柴胡皂贰d对肺纤维化小鼠血清SOD的影响及临床研究 黄洁 潘超 王旭 （镇江市江苏大学临床医学院 江苏镇江 212001) 【摘要】目的 柴胡皂贰d(SSd)是中药柴胡的主要有效成分，本实验研究通过小鼠肺纤维化模型来观察血清SOD的含量，并探讨其作用机制.方法 设立地塞米松（DXM）对照组，取肺组织行常规组织病理学观察，检测超氧化物歧化酶 (SOD)的活性并分析其临床意义.结果 DXM组肺组织匀浆SOD含量升高有显著性差异.结论 干预组对小鼠实验性肺纤维化具有明显的保护作用。 【关键词】柴胡皂贰d 肺纤维化 临床研究 特发性肺纤维化（idiopathic pulmonary fibrosis，IPF）是一种病因未明的以寻常型间质性肺炎为病理特征的肺间质性疾病，目前发病率呈上升趋势。肺纤维化是一个多因素、多步骤进行性的病变过程[1]。糖皮质激素是目前治疗肺纤维化的主要选择，本实验主要通过研究柴胡皂贰d对肺纤维化小鼠血清SOD的影响，论证SSd的治疗效果及研究其作用机制[2]。 1 材料和方法 1.1 动物分组 6周龄雄性小鼠100只，由江苏大学动物实验中心提供，体重18-20g，在江苏大学附属江滨医院医学技术实验中心饲养一周，期间自由采食，术前6小时禁食不禁水。按随机数字表法随机分为5组:空白对照组(NC组)，地塞米松干预组(DXM组)，造模后1h,各组小鼠分别腹腔注射，每天一次，连续60天，DXM组追加注射5mgkg-1地塞米松0.1ml，连续60天。正常对照组同时间按同样方法注入等体积生理盐水[3]。 1.2 仪器设备 WS17-2恒温水浴箱，U-2800紫外分光光度计BENCHMAR酶标仪(BIO～RAD)，BeckxnanJ-301高速冷冻离心机;RMZ128徕卡轮转式切片机、普通显微镜;医用手术刀、组织剪、眼科剪、止血钳、持针器、镊子等。 1.3 实验方法 1.3.1 实验原理 超氧阴离子自由基(02-2)氧化经胺形成亚硝酸盐，在显色剂的作用下呈现紫红色，用可见分光光度计测其吸光度。被测样品含SOD时，对超氧阴离子自由基有专一性的抑制作用，形成的亚硝酸盐减少，比色时测定管的吸光度值低于对照管的吸光度值，通过公式计算可求出被测样品中的SOD活性。 1.3.2 测定过程 (1)将配置好的10%组织匀浆上清用生理盐水按1:9稀释成1%组织匀浆 (2)取样本0.2ml加试剂0.2ml，漩涡混匀器充分混匀1分钟后，以3500一000转/分，离心15分钟，取上清进行Cuzn-SOD测定，此上清液即经过处理后的样本Mn-SOD活力丧失，而Cuzn-SOD活力不受影响。 (3)同时取生理盐水0.2ml加试剂七0.2ml，用漩涡混匀器充分混匀1分钟后，以以3500一000转/分，离心15分钟，取上清作Cuzn-SOD对照。 (4)混匀，室温放置10分钟，于波长550nm处，1cm光径比色杯，蒸馏水凋零。 1.3.3 计算公式 1.4 统计学方法 所有资料用均数标准差表示,统计学分析采用SPSS 13.0统计软件包,多组间均数比较采用单因素方差分析,方差分析有显著差异时,进一步用q检验作两两比较。 2 实验结果 2.1 各组小鼠肺组织SOD含量变化 各组小鼠肺组织匀浆SOD含量变化，与NS对照组比较，BLM组第3天肺组织匀浆SOD即显著下降(Plt;0.01)，第7天达最低值，14天升高，第28天逐步恢复正常值;与BLM组对照，在第3天和第7天，DXM组、Ssd组及SSd+DXM组，肺组织匀浆SOD含量升高有显著性差异(Plt;0.05);SSd组和DXM组比较，肺组织匀浆SOD含量差异无统计学意义(Pgt;0.05)。 3 讨论 SOD能清除生物氧化过程中产生的超氧阴离子自由基，是有效清除活性氧的重要酶类之一，被称为生物体抗氧化系统的第一道防线。脂质过氧化反应是连接组织损伤与肺纤维化两个过程的纽带。SOD是体内重要的清除氧自由基的酶，它的活性增加，可消除氧自由基[4]。因此，SOD可以间接反映机体清除氧自由基的能力。 通常在实验研究中SO作为指标用来研究氧化抗氧化之间平衡关系。脂质过氧化物质可通过影响肺纤维化早期炎症反应、干扰细胞的结构及功能、增加脂质介质的产生从而影响胶原代谢而导致纤维化的形成，用抗氧化剂治疗能明显减少脂质过氧化反应，从而阻止纤维化的进展