核酸扩增检测技术(NAT)在血液筛查中的重要性分析.docVIP

精品论文 参考文献 核酸扩增检测技术(NAT)在血液筛查中的重要性分析 （广元市中心血站 628107） 摘要： 目的: 分析对比核酸检测与ELISA（酶联免疫吸附试验）检测结果，对血站开展核酸检测在血液筛查的重要性进行探究。方法：以2014年7月到2015年5月我站采集的16808名献血者血液标本为研究对象，利用ELASE法对血样进行HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、梅毒螺旋体TP-抗体检测，对无反应性及谷丙转氨酶（ALT）合格标本进行核酸检测(NAT)，并将NAT检测有反应性标本送往中国输血研究所和国家卫生和计划生育委员会临检中心进行确认。结果：16808份样本中ELASE法初检和复检均为阴性且ALT合格标本16454份，经核酸扩增检测技术(NAT)检出HBV-DNA阳性标本27份。将27份阳性血样送往中国输血研究所及国家卫生和计划生育委员会检测，其中溶血拒收1份。最终结果为HBV DNA阳性9份，阳性率为56.25%（9/16），包括隐匿性感染8份，窗口期1份。结论：核酸扩增检测技术(NAT) 灵敏度较高，可弥补传统的酶联免疫吸附试验ELASE法的缺陷，减少对窗口期病毒或变异病毒漏检的可能，降低了临床用血的风险，可以推广应用于血站血液的筛查。 关键词：无偿献血；ELASE；核酸扩增检测技术(NAT)；血液筛查； 输血广泛应用于临床，无论是外伤大出血、产后大出血、术中出血等血容量不足时需要血液供给，某些血液方面的疾病如血友病、镰状细胞性贫血、严重贫血、骨髓造血减弱或抑制、血小板减少症等疾病都需要给予血液治疗[1]。我国是乙肝大国，而艾滋病、丙肝、梅毒等传染性疾病也在迅速发展[2]，由于血站采集血液通过多途径获得，且各人血液有所差异，因此血站血液筛查至关重要，尤其是HBV、HCV、HIV、梅毒螺旋体、谷丙转氨酶（ALT）的筛查，以避免输血相关性疾病的发生。然而由于HBV、HCV、HIV病毒的窗口期、隐匿性感染以及病毒可能发生的变异，传统的血清学筛查方式- ELASE法，漏检率较高，降低了临床用血的安全性。核酸作为HBV、HCV、HIV病毒的遗传物质，其在供血者机体针对病毒微生物产生特异性抗体并释放到外周血之前就已存在，因此核酸检测可大大提高HBV、HCV、HIV病毒的检出率。鉴于此，为了提高临床用血质量，降低输血传播疾病风险，本文根据我站开展核酸检测后的情况，分析核酸扩增检测技术(NAT)在血液筛查中的重要性。 1 资料和方法 1.1 一般资料 1.1.1血样来源 从2014年7月到2015年5月我站16808名无偿献血者，年龄19至55岁，平均年龄为（31.2plusmn;2.5）岁，通过健康咨询，并按照国家卫生和计划生育委员会《献血者健康检查标准》体检合格，经乙肝表面抗原金标试纸条快速筛查HBsAg阴性，ALT试纸条筛查ALTlt;50U/L，硫酸铜比重法测量血红蛋白，筛查结果均符合要求。 1.1.2血样采集 所有献血者肘静脉取血采集血样，分别放置于2支以乙二胺四乙酸抗凝的5ml真空采血管中，第1管不含分离胶，取血样用于酶联免疫检测，第2管含分离胶，用于核酸扩增检测，且核酸检测管与采血后4h内4℃低速离心，离心力1600g，离心时间20min，然后保存于2~8摄氏度冰箱中。 仪器与试剂 仪器：低温离心机、Star全自动加样仪、FAME全自动酶免检测仪、罗氏COBAS201AmpliPre全自动核酸提取系统、CTM核酸扩增检测系统。 试剂：ELISA检测试剂：HBV初检(北京万泰)、HCV初检(北京万泰)HIV初检(北京万泰)HBV复检(法国伯乐)、HCV复检(索林)HIV复检(法国伯乐)核酸检测试剂：罗氏配套HBV、HCV、HIV联合检测试剂（罗氏公司） 1.3检测方法 1.3.1酶联免疫检测 血液采集离心后，经Star全自动加样仪加样，于FAME自动酶免检测仪检测，项目包括HBsAg、HCVAg/Ab、HIVAg/Ab,TP抗体，且初检和复检检测由不同的检测人员采用两种试剂完成。 1.3.2核酸扩增检测 按标准操作规程进行试剂及耗材准备，经ELASE初检复检合格的标本，严格按照标准操作规程，离心20min（离心力1600g），于全自动核酸检测系统逐步完成核酸提取、扩增与检测。 1.3.3结果确认 对核酸扩增检测阳性标本留取血浆，将血样送往中国输血研究所和国家卫生和计划生育委员会临检中心进行确认。 2.结果 2.1 ELASE检测结果 16808份样本中ELASE法初检和复检阳性654份，其中乙肝表面抗原（HBsAg）阳性88份，