核酸降解与死亡时间推断的研究进展.docVIP

精品论文 参考文献 核酸降解与死亡时间推断的研究进展 田强1*（综述） 覃双英2 熊平（审校） (1南华大学医学院法医学教研室 湖南衡阳 421001；2湖南澧县人民医院六病室 湖南常德 415500) 【中图分类号】R89 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085 (2010)31-0398-02 【摘要】 死亡时间的推断一直是法医实践中的难题。迄今为止仍没有一种推断死亡时间的准确方法。随着分子生物学和检测技术的发展，对DNA和RNA降解量进行检测将成为死亡时间推断研究的主要方法之一。本文将对DNA、RNA的降解及与死亡时间的进行综述。 【关键词】 死亡时间推断 核酸 雪旺氏细胞 图像分析系统 死亡时间推断（estimation of postmortem interval ）是法医病理的重点和难点之一。准确的推断死亡时间在死亡案件的刑事侦查活动中具有重要的意义。随着分子生物学的发展和检测技术的更新,DNA和RNA的降解逐渐成为法医学研究的焦点。本文将对DNA和RNA的降解及与死亡时间的关系进行综述。 1 DNA 降解与死亡时间 DNA作为生物体的遗传物质,具有稳定性好、受外界影响小等特点[1]，细胞内DNA的含量随着死后时间的延长逐渐降解,呈现一定的趋势。 1.1 特殊染色技术和图像分析技术在推断死亡时间的应用 Feulgen 染色和图像分析技术相结合可以简单、方便的对DNA的含量进行检测。用[2]Feulgen 染色和图象分析技术对死后不同时间、不同温度下的大鼠骨骼肌细胞核DNA含量变化进行分析，骨骼肌细胞在死后12h出现核着色变淡、着色面积变小,并随死后时间延长呈持续性下降。赵一鸣等用[3]Feulgen 染色法及图像分析技术观测大鼠死后坐骨神经雪旺氏细胞DNA染色变化，认为在大鼠死后9d内坐骨神经雪旺氏细胞核DNA变化与死亡时间有一定的相关性。 1.2 流式细胞术在死亡时间推断的应用 用[4]流式细胞术对大鼠死后心、肝、脾、肾器官组织DNA含量测定。显示各器官组织细胞DNA含量随死亡时间延长均呈下降趋势,以脾组织细胞的DNA含量变化与死亡时间最具相关性，肝、肾次之，心脏组织细胞最差。包容等[5]用流式细胞术检测离体血液白细胞二倍体峰荧光强度、细胞碎片含量，认为流式细胞仪??测的白细胞DNA含量与离体时间无相关性,用其检测DNA含量推断死亡时间应该是不合适的。陈新等[6]用流式细胞术和图像分析两种方法对死后人体心、肝、脾、肾内DNA含量的变化进行测量，认为各器官组织细胞核DNA含量随死亡时间延长逐渐减少，以脾细胞核DNA变化趋势与死亡时间最具相关性。 1.3 其他技术 赵小红等[7]应用单细胞凝胶电泳技术直接检测大鼠死后不同温度下脑、骨髓DNA降解的情况，认为大鼠死后早期，不论在10℃还是20℃下，脑、骨髓细胞核Head DNA%的下降与PMI之间存在着良好的线性关系，死后细胞核内Head DNA%变化与环境温度成正相关;在相同的环境温度条件下，脑细胞核Head DNA%的下降速度较骨髓细胞快。熊平等用[8]激光共焦显微拉曼光谱技术对死后不同时间人体肾、肝组织DNA含量分析，认为人死亡后肾、肝组织细胞DNA含量随死亡时间延长呈下降趋势,两者之间存在线性关系。 2 RNA的降解与死亡时间的关系 普遍认为RNA的代谢比DNA活跃，更易于降解。所以导致其在死亡时间推断研究中一直不被重视。直到1986年Johnson等[9]发现脑组织中的RNA具有相当高的稳定性。关于RNA研究才被重视。 2.1 RNA降解存在组织差异性 梁赞姜等[10]用RT-PCR技术在18℃条件下检测大鼠心、肝、脾、肾beta;肌动蛋白(beta;-actin) mRNA在死后不同时间的表达,结果显示大鼠脾脏beta;-actinmRNA在死后12d内都可以检测到,心脏beta;-actinmRNA在死后10d内都可以检测到,肾脏beta;-actin mRNA在死后8d内都可以检测到,肝脏beta;-actin mRNA在死后4天内都可以检测到。 2.2 不同温度条件下RNA的降解存在差异 文献[11]报道，低温不利于RNA的降解，高温条件下RNA不稳定，易降解。Inoue等[12]发现常温下心脏来源的mRNA,肝组织的mRNA在死后第1d就已经降解。而20℃条件下死后脑组织的mRNA最为稳定。 刘季等[13]分别于15℃、20℃在死后4-7d的大鼠脑组织中检测