反应分离耦合酶法制备D苹果酸研究.pdfVIP

K061 反应分离耦合酶法制备 D-苹果酸 * 章云 曹惠君 吴俊清 何冰芳 欧阳平凯 （南京工业大学制药与生命科学学院，南京 210009 ） 摘 要 本文用 Pimelobacter simplex DM18 菌的马来酸水合酶高效转化马来酸制备 D-苹果酸。 利用马来酸和 D-苹果酸的钙盐溶解度低的特点，以马来酸钙为底物，经水合酶催化加水转化成 D-苹果酸钙，实现边反应边分离产物的反应分离耦合的目的。反应 36 小时，可生成 385g/L 的 D-苹果酸钙，折合 300g/L 的 D-苹果酸，其转化率可接近 99%，D-苹果酸的光学纯度达到 97.03 ％。 关键词 反应分离耦合 马来酸水合酶 马来酸钙 D-苹果酸 MALEASE-CATALYZED PRODUCTION OF D-MALATE BY COUPLING REATION AND SEPARATION ZHANG Yun,CAO Hui-jun, WU Jun-qing,HE Bing-fang, OUYANG Ping-kai (College of Life Science and Pharmacy, Nanjing Industry University, Nanjing 210009, China) Abstract This report describes the effective production of D-malate from maleate by maleate hydratase of Pimelobacter simplex DM18. The conversion of high concentration of Ca-maleate into Ca-malate was achieved by maleate hydratase, owing to the low solubility of both Ca-maleate and Ca-malate complex. Coupling reaction and separation was beneficial to both product concentration and downstream processing costs. After 36 hours of reaction, 385g/L of Ca-D-malate was produced. This is equivalent to 300g/L of D-malic acid, with the molar yield of 99%. The optical purity of the produced D-malate was 97.03% by HPLC. Keywords coupling reaction and separation, maleate hydratase, Ca-maleate complex, Ca-D-malate complex 引 言 随着医药工业的发展以及对手性药物规则的进一步严格，手性前体的生产得到极大的关 注。D-苹果酸主要应用于手性药物合成、手性添加剂、手性助剂等领域，如：抗生素[1]、药 物信息素[2] [3] [4] [5] [6] 、抗病毒药物 、抗癌药物 、HMG-CoA 还原酶抑制剂 、抗组胺药 、维生素 （R ）-泛酸[7]等合成。 D-苹果酸合成方法主要有化学拆分法、生物拆分法（或生物降解法）、生物转化法(酶 法)等。化学拆分法成本高，国内进行了消旋体苹果酸的生物拆分研究工作，但 D-苹果酸对 菌体生长有抑制作用，D-苹果酸的生产浓度极低[8] 。国内还没有生物转化法制备 D-苹果酸 的研究报道。国外Asano Y.等[9],Van der Warf M. J.等[10]及 He B.-F.等[11]报道了从马来酸