PCV2ORF2基因的表达、纯化及小鼠免疫效力研究.pdf

摘要 猪II型圆环病毒(PCV2)是近年来发现的动物病毒之·，该病毒与猪的多种疾病综合 症有关，特别是仔猪断奶后多系统衰竭综合症。该病最早于1991年在加拿大西部发现， 病原学及血清学调查表明在许多国家都广泛存在，给全球养猪业造成了巨大的经济损 失。研究表明在主要的几个开放阅读框中，ORFl相对保守，主要编码病毒的复制蛋白， 而ORF2相对变异较大，是主要的免疫原性基因，也是PCV2亚单位疫苗研制的主要对象。 为了了解PCV2在我国的流行现状以及研制安全、高效的疫苗用于PCV2感染的防治，本 课题对PCV2基因工程疫苗进行了探索研究，主要研究内容如下： 以河南省猪圆环病毒阳性仔猪的脾脏为材料，提取病毒DNA，根据已报道的PCV2 序列设计合成2对引物，应用PCR技术，扩增出猪圆环病毒野毒株ORF2基因和去信号 pUCm-T／ORF2，并进行核苷酸序列测定。 组质粒pET-32a／CORF2、pET-41a(+)／ORF2。 blotting检 效表达，其表达的蛋白以包涵体形式存在，表达产物的分子量为38KD左右，与理论推测 效果不是很好，经换载体与表达菌