PCR实验室的生物安全PPT.ppt

;outline;总论; 实验室每天要处理来自临床的标本，如血液、穿刺液、分泌物等，对这些“未知疾病标本”无法得知其危险程度，因此，每个临床实验室每天都面临生物安全隐患;细菌（bacteria） ;病毒 （viruses） ;Harrington和Shannon在1976年的调查中发现，结核分枝杆菌、乙型肝炎病毒与志贺菌已成为英国临床实验室工作人员最为常见的职业性感染原因;临床实验室生物污染的原因及种类;空气污染;水、人体、物体表面污染;化学源危害;物理源危害; 实验室工作人员在实验过程中受到实验室生物污染而发生的感染;东北农大师生因动物实验感染严重传染病 ; 2003年9月9日，新加坡一名患者被确诊感染了非典病毒。 这名27岁的男子是新加坡国立大学专门研究西尼罗病毒的微生物实验室的一名研究生。由11名专家组成的国际调查小组认为，不恰当的实验程序、以及西尼罗病毒样本与非典冠状病??在实验室里的交叉感染，可能是这名患者感染非典病毒的原因 ;实验室感染的途径;消化道摄入传播;职业HIV感染;临床实验室安全管理;生物安全防护（biosafety containment）指在实验室环境下处理和保存感染性物质的过程中采用的一系列的防护措施，包括一级防防和二级防护;一级防护与二级防护;个体防护装备;个体防护装备;个体防护装备;生物安全柜;实验室分区; 实验室的出口和通道必须保持畅通无 阻，不准堆放物品、垃圾、装置或设备 ;BSL-2级实验室生物安全;二级生物安全防护实验室安全操作规程;;;;;二级生物安全防护实验室安全操作规程;二级生物安全防护实验室安全操作规程;二级生物安全防护实验室安全操作规程;二级生物安全防护实验室安全操作规程;二级生物安全防护实验室安全操作规程;二级生物安全防护实验室安全操作规程;PCR实验室的生物安全;PCR技术的基本原理与PCR技术的特点;PCR技术的基本原理;PCR技术的基本原理;PCR反应特点;PCR反应特点;PCR实验室基本概况;;;各个分区的生物安全规范;各个分区的生物安全规范;（一）试剂贮存和准备区 ;在整个区的实验操作过程中，操作者必须戴手套，并经常更换。此外，操作中使用一次性帽子也是一个有效地防止污染的措施。 严禁用嘴吸取液体，加样器和吸头等必须经高压处理。 工作结束后必须立即对工作区进行清洁。本工作区的实验台表面应可耐受诸如次氯酸钠的化学物质的消毒清洁作用。实验台表面的紫外照射应方便有效。由于紫外照射的距离和能量对去污染的效果非常关键，因此可使用可移动紫外灯（254nm波长），在工作完成后调至实验台上60－90cm内照射。由于扩增产物仅几百bp，对紫外线损伤不敏感，因此紫外照射扩增片段必须延长照射时间，最好是照射过夜。实验室及其设备的使用必须有日常记录。 ;（二）标本制备区;对实验台适当的紫外照射（254nm波长，与工作台面近距离）适合于灭活去污染。可移动紫外线管灯可用来确保工作后对实验台面的充分照射。 样本处理对核酸扩增有很大影响，必须使用有效的核酸提取方法，可在开展临床标本检测前对提取方法进行评价。;（三）扩增区;为避免气溶胶所致的污染，应尽量减少在本区内的走动。如有加样则应在超净台内进行。打开预处理过的反应混合液时必须防止液体溅出，尤其是在巢式扩增步骤之间。一个简单的方法是在打开反应管前快速离心数秒。可使用体积较小的离心机，因其所占实验台面小，易于用一只手操作，适合于大多数超净台。防潮屏障如石蜡油或轻矿物油也具有防污染作用，但必须注意的是，矿物油本身也可能成为一种持续性的污染源。用过的加样器必须注意清洁消毒。 完成操作及每天工作后都必须对实验室台面进行清洁和消毒，紫外照射方法与前面区域相同。如有溶液溅出，必须处理井作出记录。;（四）扩增产物分析区;由于本区有可能会用到某些可致基因突变和有毒物质如澳化乙锭、丙烯酸胺、甲醛或同位素等，故应注意实验人员的安全防护。 本区的清洁消毒和紫外照射方法同前面区域。本区如采用负压条件或减压情况下（如安装排风扇）可减少扩增产物从本区扩散至前面区域的可能性 ;实验室污染;实验室污染;实验室污染;在实验室中引起火灾的通常原因;防火;现场配备： 灭火设备 报警装置 疏散路径 通道标识;1. 加热 ? 安全使用酒精灯 2. 明火 ? 实验室内严禁吸烟 ? 在使用易燃气体和易燃试剂的实验室内不得使用明火 ;灭火;灭火器基本知识;导线或电器着火时，应先断电，再用干粉灭火器灭火 衣服着火时，应