革兰阴性杆菌产β-内酰胺酶及其耐药分子机制的研讨.pdfVIP

— — 308 —— ChinJLabDiagn，February，2013，Vol17，No．2 文章编号：1007～4287(2013)02—0308—04 革兰阴性杆菌产 』3一内酰胺酶及其耐药 分子机制的研究 冯体玉 ，徐韫健孙 ，李 宁。，余 琳 (1．梅州市人 民医院 检验科 ，广东 梅州 51403l；2．广州医学院第一附属医院 检验科 ，广东 广州 510120) 摘要 ：目的 分析革兰阴性杆菌所产 G一内酰胺酶的表型及基 因分型，并研究其耐药分子机制 。方法 用纸片扩 散初筛试验、扩散确证试验进行超广谱 0一内酰胺酶 (extendedspectrum beta-lactamases，ESBLs)表型检查 ，头孢西丁 三维试验进行AmpC~l一内酰胺酶的表型检查，纸片协同试验筛选产金属 8一内酰胺酶(metallo—beta—lactamase，MBL)菌 株；用多重 PCR技术扩增B一内酰胺酶基因并进行DNA测序；用PCR技术扩增基因元件整合子、插入序列 ISEcplB 和转座子 tnpU；用 MIC药敏法分析革兰 阴性杆菌的药物敏感性 。结果 ①革兰阴性杆菌 8一内酰胺酶的表型总检 出 率为 24．28 (42／173)，主要 由单产 ESBLs引起，占13．29 ， 内酰胺酶的基因型总检出率为 24．86 ；②整合子检 出49株占28．32 ，ISEcplB插入序列检出29株 占16．76 ，转座子 tnpU检出28株 占16．18 ，基因元件阳性的菌 株大多数 内酰胺酶表型为阳性 ；③p一内酰胺酶阳性菌株对抗生素的耐药率显著高于阴性菌株 。结论 革兰阴性杆 菌可携带多种 0一内酰胺酶，基 因元件广泛分布于革兰 阴性杆菌 中，可能在多重耐药机制中起重要作用 。 关键词 ：B一内酰胺酶；整盒子 ；转座子 ；插入序列 中图分类号：R446．5 文献标识码 ：A Studyonp-LactamaseinGram。negativeBacilliandMolecularMechanism ofAntibioticResistance FENGTi—yu，xU Yun—jian，LiNing，eta1．(DepartmentofClinicalLaboratory，MeizhouPeoplesHospital，Meizhou，Guangdong 514031，China) Abstract：Objective Toinvestigatethephenotypicalandgenotypicalcharacteristicsofthet?-lactamaseinGrain— negativebacilli．Methods Thephenotypesofextendedspectrum t?-lactamase(ESBLs)weredetectedintheGram—nega— tivebacillibydiscdiffusionscreentest，whichwerefurtherascertainedbydiscdiffusionconfirmatorytest；AmpC beta— lactamasesweretestedbycefoxitinthree—dimensiontest：metallo—beta-lactamase(MBL)weretestedbydouble—discsyn— ergytest．．Thegenotypesof~-lactamasesweredetectedbymultiplePCRamplification，thenDNA productwasse— quenced．PCR wasperformedtOscreenthegeneofintegron，insertionsequenceISEcplB ，transposontnpU ．Antibiotics susceptibilitofgram—negativebacilliwasdetectedbyMICsusceptibilitymethod．Results ①Amongtheclinic