蛋白酶高产菌株的选育及酶学性质研讨.pdfVIP

of YieldProtease ScreeningHigh Producing StrainsandResearch on Enzyme Characterization A DissertationSubmittedto theGraduateSchoolof HenanNormal University in PartialFulfillment ofthe Requirements forthe of Degree MasterofScience By ZhiJun Supervisor：Du Qiyan． May,2011 0IIIIIFII]11111111111111 11111 11l Y1 摘要 从新乡市周边郊区的蔬菜大棚、奶牛养殖场、养鸡场、养猪场、豆制品加工 厂、鱼塘沉积的污泥以及埋死鱼的土壤、倾倒豆渣的土壤等8处蛋白质含量较高 的土壤中分离得到了一株高产蛋白酶性质优良的菌株N1，对其产酶的酶学性质 进行研究，试验结果表明，该蛋白酶最适作用温度为60C，最适作用pH为6， 酶活为1998U／ml。通过紫外线照射处理对菌株进行人工诱变，结果表明在紫外 线照射处理30s时，菌株致死率达到92％，此时正突变率较高，诱变效果较好。 2406U／ml，提高了21％。通过5次传代，测定酶活力结果显示该诱变后菌株产酶 的酶活力变化不大，具有较好的稳定性。通过对菌株的菌落及菌体特征鉴定、16S rRNA的序列分析，判断该菌株为黄杆菌，并构建系统进化树显示其种属同源性。 壤中获得的一株黄杆菌属菌株，经过人工诱变之后使该菌株产生的蛋白酶活力提 高了近3倍，产生的蛋白酶具有较好的热稳定性、较广泛的pH适应范围以及较 高蛋白酶活性，为蛋白酶的工业生产提供了一个优良菌株，该菌株可以作为蛋白 酶高产菌株应用于饲料、洗涤剂等工业生产中。 关键词：蛋白酶，菌种选育，黄杆菌 ABST]RACT the ofthe chicken Fromsoil dairyfactories，the factories，the greenhouses，theraising raising fish soilburieddeadfishand of factories，soybeanprocessingplants，sludgepond，the raisingpig soi