一株拮抗烟草青枯病菌的真菌的筛选与鉴定 The screening and identification of an active fungus against tobacco wilt pathogen Ralstonia solanacearum.pdfVIP

生态环境学报201 1，20(10)：1418—1423 http：／／www．jeesci．com and EnvironmentalSciences Ecology 一株拮抗烟草青枯病菌的真菌的筛选与鉴定 周晓见L2，陈毓遒1，缪莉L2，董昆明L2，董夏伟1，靳翠丽1’垆 1．扬州大学环境科学与工程学院，江苏扬州225127；2．扬州大学海洋科学与技术研究所，江苏扬州225127 摘要：为寻找烟草青枯病的生防微生物，研究采用平板涂布法从重庆烟田健康土壤中分离根际微生物，纯化后得到了59株 mill。 其抑制活性优于或接近于近期发现的其他生防微生物。测定该株活性真菌的全细胞脂肪酸组成，进行菌落和分生孢子形态学 观察，以及rDNA 结果，以及对所获rDNA ITS区序列的分析，鉴定该株真菌为烟曲霉(Aspergillusfumigatus)。 关键词：抗菌活性；真菌；青枯雷尔氏菌；鉴定 中图分类号：$435．72 文献标志码：A 文章编号：1674．5906(2011)10．1418．06 烟草青枯病是热带、亚热带地区烟草的重要病 原来是指生存在植物根圈范围中，对植物生长有促 害，1880年该病首先在美国的北卡罗来纳州被发进或对病原菌有拮抗作用的有益的细菌统称。而深 现，此后，在许多产烟国家逐渐演变为烟草上的重 入的研究发现，不仅原核微生物的某些放线菌或者 要病害，如Et本、澳大利亚、韩国等。在中国，长 细菌都可以起促生作用，而且作为真核微生物的许 江流域及其以南烟区该病普遍发生，其中发病面积 多真菌也同样具有具有促生功能。但研究者仍用 较大、为害较重的有广西、广东、福建、湖南、浙 PGPR来泛指包括细菌、放线菌和真菌在内的植物 江等省(自治区)及安徽省的皖南烟区、四川省的宜 根际促生微生物。根际促生微生物能够在根际土壤 宾和泸州烟区等【l】。烟草青枯病病原为青枯雷尔氏 中快速增殖，并能抑制有害微生物和位于根部表面 菌(Ralstoniasolanacearum)。一旦发病即可造成的土壤中的致病菌，一些根际促生微生物还有刺激 全株死亡，对烟草的产量和质量影响极大，是烟草 植物生长的作用【l41。但是，总体而言，促生真菌的 上一大毁灭性病害瞄J。 研究相对较少Il引。 截至目前，仍然没有针对青枯病的特效方法[3】。 本文的研究是从重庆烟区健康土壤中，从健康 目前主要采用的防治方法包括农业防治、化学防治 烟草根际分离、筛选和纯化出能抑制青枯雷尔氏菌 和生物防治等。农业防治如轮作、培育和推广抗病 的真菌，并对菌株进行分类鉴定。 品种等，但是烟株的抗性有一定的局限性，品种的 1材料与方法 抗性强弱受多方面因素制约，随着种植年限延长， 1．1供试病原菌 抗性将逐年丧失；化学防治是利用药剂抑制青枯 病，虽然能起到一定的作用，但是长期大量施用化 学药剂容易使细菌产生抗药性，引起土壤质地变 菌种由江苏省固体有机废弃物资源化利用高技术 化，造成环境污染和烟草的药剂残留，严重影响人 重点实验室提供。 体健康[4】。生物防治选择性强，无污染，不易产生 1．2试验所用培养基 抗性，对人体无害，是一种具有广阔前景的绿色防 TTC培养基：蛋白胨10．0g，葡萄糖10．0 g， 治方法，因此，近年来青枯病的生物防治越来越引 牛肉膏3．0 g，酵母膏1．5 起国内外的重视【5。6J。