大豆疫霉菌1号生理小种的鉴定.pdfVIP

大豆疫.菌1号生理小种的鉴定’ 朱振东 王晓鸣 (中国农业科李院作物品种资抓所，北京 100081) 扭县 应用屁抽伤口接种方法接种标准的大3连零曲生理小种鉴刘哥主，将从合早+F大豆品种推病桂 株止分离的大豆凌零目蔺株鉴定为1号生班小种。通过25个反龙江截培大豆品种对该小种的it性评 价。结果表明:80 的品种为感病品种。建妞在病区截培枕病品种的网时，Ae任衬病品种纬选，廷坟析 小种的产生. 关.调 大豆夜零目 生盆小种 枕性评价 大豆疫.根庸病广泛发生于世界各大豆主产区，是形响大豆生产的级灭性病容之一，其致病 菌大豆疫.菌 (PhytophthorasojaeM.J.KaufmannJ.W.Gerdemann,异名P.nugasperma Drechs.f.ap.恤‘ineaT.KuanD.C.Erwin)具有很高的变异性，到1995年B有39个生 理小种被鉴定，而且不断有新的小种产生。在我国，苏彦纯和沈祟尧1989年在东北大豆产区第一 次分离到大豆疫母菌。目前，大豆疫.菌已成为影响黑龙江大豆生产的主要病原菌，而且存在明 显的致病力分化现象。 1材料与方法 1.1病原，分离与致润力侧定 大豆始花期在田间采集病株进行分离。分离时取10cm左右长的具有典型茎部病斑的茎秆，用 自来水反复冲洗。洗净后用75%的酒精表面消毒，消毒后用无菌水冲洗数次，最后用无苗吸水纸 将茎秆表面水吸干。在病健交界处切取约lomm，大小的组织接种在PBNIC胡萝 卜琼脂选择性培 养基上 (1000ml培养墓加50%苯菌灵0.01g,75%五灵混剂0.054g,50%异，脉0.04g,硫映新 霉素。。1g,抓母素0.Olg，所有药品均在高压灭菌前加人)。培养皿在室沮下 (20^-28C)培养， 3天后在显徽镜下进行病原菌鉴定。挑取与P.sofa。生长特征相似的菌落的，丝尖端转入选择性培 养荃上作进一步纯化和鉴定.纯化后的大豆疫.菌在稀释V8汁琼脂培养羞(40mlV8汁、CaC03 0.6g,蔗格1g,醉母浸出汁0.2g,琼AN20g,燕份水1000ml)上培养。选择一个从合丰25大 豆品种病株上分离的菌株在Williams(含rps墓因)、合丰25和绥农10号大豆品种上进行致病力 讨定，接种方法与生理小种鉴定方法相伺。 1.2生理小种鉴定方法 1.2.1接种体培养和制备 在25C黑暗条件下，大豆疫母菌在含100琼脂的稀释V8汁培养荃上 培养8天，然后用50ml注射器将菌丝体和培养基一同匀浆，装入带7号针头的2m1注射器用于接 种。 1.2.2 供试大豆植株的培养 标准的生理小种鉴别品种 (品系)Harlon(Rpsla),Harosoy13XY (Rpslb),Williams79(彻slc),PI103(Rpsld),Williams82(Rpslk),Chapman(Rps3),Harosoy 62XX(Rps6),Harosoy(Rps7)由美国俄亥俄州立大学A.F.Schmitthenner博士提供。各品种选 ·国家 “九五一攻关裸甩资助，本研究得到旅法超翻研究员、田玉兰同志的热情带助和支掩，在此农示感甘。 15粒分别播种以摇石为墓质的塑料花盆，出苗前温室温度控制在25^-29C，出苗后温度控制在is 一25C.10天后每品种选择10株大小一致的苗接种。 1.2.3接种方法(胚轴伤口接种) 在大豆子叶下。.5cm处用针尖向下划km左右长的伤口，将 接种体注入伤口处。接种后在喷雾室保湿48小时 (18-25C),然后转人25C温室培养。接种4 ^-5夭后调查发病情况，一个品种如果有7株或以上的植株死亡则为感病 (S)，如有7株以上的植 株不发病则为抗病 (R),死亡植株在4^-6株的为中间类型 (I).试验盆复3次。 1.3大豆主栽品种抗病性鉴定 25份黑龙江省大豆栽培品种由中国农科院品资所提供。抗病性鉴定方法与生理小种鉴定方法 相同。 Z 结果与分析 2.1大豆度二 的致脚力侧定结果 应用胚轴伤口接种技术，供试大豆疫.曹菌株导致Willi~ 和合丰25植株全部死亡，绥农10 号不发病，表明该菌株为大豆疫.根房病致病菌，对感病品种具有很强的致病力，同时具有专化 性。 2.2生理小种的鑫定结果 供试菌株在8个含不同