大豆疫霉菌的土壤诱集检测.pdfVIP

大豆疫.菌的土族诱集检测’ 彭金火 (大迷动位.位度局，大述116001) .共 农用大豆叶裸诱条的才法研宪了影响大五晚布(PhytoptuharamjaeKauf.二Gerdemann)d. 峨检侧的目tI.绝策衣，，自热盛染的风+土 ‘加落钻术遥润豆饱和获抉近饱加状态，充瓜.件下妞堪 葬4-6天，加5--1Omm滚的落偏术注泡.效后S.感病大豆品种的叶4钧集6^-24小叶.可ul权 ‘定地 检州川大豆度零.叶裸诱集后用落.水洛莽蕊用乌井性堪葬基络葬的抢润效果相权.住用落.水场葬畏 于抢全检侧始果，幽诱集用娜体叶裸来自含扰病基目的大A苦种的位株时，只有蕊充皿该 ‘口的火止连 霉.能放诱泉和检侧别。 类.视 大A连忿 土坡脸侧 叶4诱泉 选择性诱泉 大豆疫. (PhytophthorasojaeKaufmannGerdemann,异名Phytophthorantegasperma Drechslerf.sp.glycineaKuanErwin，PhytophthoramegaspermaDrechslervar.sojaeHilde- brand)最早见于北美，引起大豆的根肠和茎扁病(简称大豆夜病)，是当地大豆上最，要的病害之 一。从1989至1991年的3年中，大豆疫病仅在美国中北部的12个州即造成279万吨的产f扭失， 经济价值高达5.6亿美元。该病在中国仅有区城性分布，是我国对外公布的一类危险性植物病容。 近年来，从美国等有大豆疫.分布的国家进口商品大豆日趋增多，其中经常夹带一定f的土 城。由于大豆疫.是典型的土传宾菌病容，卯抱子能在土旗中长期生存.因此进境大豆夹带的土 城中仍有可能挑带大豆疫娜病菌.尽管种子可能是大豆痰.传播的班径之一，但从千澡甚至稍徽 阴干的带病大豆种子中分离不到病原，或孺经2个月的沮冷处理才能使病种子中的卯抱子菌发， 不适合检疫检验。醉联免疫荧光 ((ELISAs)已广泛地应用于痊.病害的位侧和诊断，但所用抗体 缺乏种的特异性，甚至能和某些扁.和箱母菌发生交又反应，检洲到的病原也有可能是死的，也 不适合位疫检脸.采用土镶预培养后用大豆幼菌，子叶或叶旅 (leafdisc)诱集 (batting》的方法 则可有效地检侧到土城中的活大豆疫哪，但土城培养所偏的水分和时间，诱集所孺时间等则没有 详细报道。 本研究采集田间自然感病的土城，采用大豆叶碟诱集的方法，对土族琐培养的时间、加水t. 光照以及叶碟诱集时间等因素对检侧大豆疫.的形响进行了初步探索，以求建立适用于口岸常规 检疫的大豆疫称检侧方法. 1材料与方法 1.1 自然感润土.的采魏和准备 供试带菌土坡取自加拿大Harrow的Woodslee大豆疫病扰病性检侧翻。采用多点取样方式， 取2^-15cm以内的土城，混匀，暇碎后过蹄 (孔径2mm)，室退下风干7天，装入塑料袋备用. 1.2性洲方法 除非特别指明，本试脸的各处理均取1勺风干土至50ml烧杯内，加2.5-15ml燕伯水湿润， 用Parafilm膜封口保湿，里有光或无光条件下培养1^-9天，再加燕馏水10^-25ml没泡.立即加 。本文系作者在加*大安大略州哈，市沮主及加工作钧中心的研究工作，承Dr.TearyAndenon热心指导。班此致谢. 594 20片直径5mm的大豆叶碟 (取自感病品种HARO1-7)，诱集15分钟至24小时，取出叶碟，灭 菌燕馏水冲洗2次，置含15mlPPSH (利马豆)培养基，或燕瀚水的9cm培养皿内培养1-3天， 在双筒解剖镜下检查有无大豆疫祥菌特征性菌丝(PPSH上)抱子囊 (燕摘水中)从叶碟边缘长出. PPSH培养荃为含匹马a素 (8mg/1),青母家 (250mg/l),链祥家 (50mg/l)和恶.灵 (10mg/ 1)的利马豆固体培养基。堵养均在室沮 (22^-26);)下进行。 1.3影响大豆盛砚位洲率的因素 1.3.1PPSH或燕馏水培养和植出率 土城加4m1燕相水提润，培养5天，loml燕饱水浸泡，叶 碟诱集6小时后取出至PPSH上或燕份水中培养，每处理含3个烧怀，重复4次，计算烧杯检出率 和叶碟侵染率。叶碟边缘只要长有1个抱子续，或长出一至致根大豆度娜特征性苗丝，即认为该 叶碟已被怪染.每个烧杯的20片叶碟中，只要有1片叶