毒素检测技术交流.ppt

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毒素检测技术交流

常见的真菌毒素的种类 毒素的分布 毒素的检测方法 毒素的检测标准 真菌毒素 黄曲霉毒素 4种主要的黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2,加上代谢物M1可以直接地污染食品和饲料。 在所有真菌毒素中,黄曲霉毒素B1的毒性、致癌性、污染频率均居首位。 黄曲霉毒素B1是已知各种真菌毒素中最稳定的一种。 黄曲霉毒素 黄曲霉毒素常常存在于土壤、动植物、各种坚果特别是花生和核桃中。在大豆、稻谷、玉米、通心粉、调味品、牛奶、奶制品、食用油等制品中也经常发现黄曲霉毒素。一般在热带和亚热带地区,食品中黄曲霉毒素的检出率比较高。 赭曲霉毒素A(Ochratoxin A) 赭曲霉毒素是赭色曲霉属(Ochraceors)和几种青霉属真菌产生的一种毒素,包括A、B、C等7种结构类似的化合物,其中以赭曲霉毒素A毒性最大。赭曲霉毒素A是稳定的无色结晶化合物,溶于极性溶剂和稀碳酸氢钠溶液,微溶于水。 赭曲霉毒素A 赭曲霉毒素A会对多种食用了受其污染饲料的家畜和野生动物的肾脏造成损害。 一般容易感染赭曲霉毒素A的商品包括:大豆、绿豆、绿咖啡豆、酒、啤酒、葡萄汁、调味品、草本植物、猪肾。 伏马毒素(Fumonisins) 伏马菌素是1989年发现的一种新型毒素 白色粉末,易溶于水、甲醇及乙腈-水中。伏马菌素在乙腈-水(1+1)中稳定,在25C下可保存6个月 目前至少已鉴定出15种不同的伏马菌素的类似物,但大部分在自然界未被分离到。伏马菌素B1和B2是自然界存在最普遍,且毒性最强 伏马毒素 伏马菌素大多存在于玉米及玉米制品中,其含量一般超过1mg/kg,研究证实,在大米、面条、调味品、高粱、啤酒中也有较低浓度的伏马菌素存在。 呕吐毒素 (deoxynivalenol,DON) 呕吐毒素(Vomitoxin)又称脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON),主要产生菌是禾谷镰刀菌。它可导致动物肠功能紊乱(腹泻,呕吐),口腔黏膜和真皮损伤,免疫力下降。当呕吐毒素含量超过1 mg/kg时,就会引起猪采食量减少,体增重减慢。当饲料中呕吐毒素的浓度达4 mg/kg以上时,会导致采食量严重下降、拒食、生产性能降低。 呕吐毒素一般在大麦、小麦、玉米、燕麦中含有较高的浓度,在黑麦、高粱、大米中的浓度较低。 T-2毒素 是单端孢霉烯族化合物之一 它广泛分布于自然界,是常见的污染田间作物和库存谷物的主要毒素,对人、畜危害较大。 1973年联合国粮农组织(FAQ)和世界卫生组织(WHO)在日内瓦召开的联席会议上,把这类毒素同黄曲霉素一样作为自然存在的最危险的食品污染源,尤其是美国指责前苏联、越南在东南亚使用“黄雨(yellow rain)”毒素(其中含有T-2毒素)以后,有关T-2毒素对人类健康的危害引起了各国科学家的较大关注 展青霉素 展青霉素还具有致畸性、致突变性和致癌性。 主要存在于霉烂的苹果和山楂中 玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZON) 玉米赤霉烯酮主要存在于玉米、玉米制品、干草和青贮饲料中,小麦、大麦、高粱、大米、小米、芝麻中也有一定程度的分布。玉米赤霉烯酮主要污染玉米、麦类、谷物等。 玉米赤霉烯酮具有较强的生殖毒性和致畸作用,可引起动物发生雌激素亢进症,导致动物不孕或流产,对家禽特别是猪、牛和羊的影响较大,给畜牧业带来经济损失。饲料中1mg/kg的玉米赤霉烯酮就会使动物产生雌性化,更高的浓度(50-100mg/kg)将会对怀孕、排卵、移植、胎儿的发育、新生动物儿的生存力产生不利的影响。 展青霉素 限量要求 真菌毒素的检测步骤 取样 提取 提取剂:乙腈-水或甲醇-水 提取方式:振荡或均质 净化 液液萃取 固相萃取净化 多功能柱净化 免疫亲和净化 液液萃取 液液萃取是利用相似相溶的原则,选择适当的溶剂和萃取条件, 从混合物中萃取黄曲霉毒素,从而达到分离的目的。液液萃取法设备简单,操作快速,特别是分离效果好,故应用广泛.缺点是费时,工作量较大;萃取溶剂常是易挥发、易燃和有毒的物质,所以在应用上受到限制。 固相萃取净化 多功能柱净化 优点: 使用方便、快捷 多功能柱有较长的保质期 可用于多种毒素的分析 缺点: 非特异性 免疫亲和净化 分析 定量: 高效液相色谱法 LC-MS/GC-MS 半定量 薄层色谱 酶联免疫法 黄曲霉毒素的分析方法 分析方法 薄层色谱法 酶联免疫法ELISA 免疫亲和-分光光度法 免疫亲和-高效液相色谱法 薄层色谱法 TLC法能够容易地决定毒素是否存在, 而对于毒素的定量分析只有在结合密度扫描的情况下,才能完成。薄层色谱法是黄曲霉毒素检测中的经典方法,传统的TLC法样品前处理繁琐且净化效果欠佳,使用双向展开进一步增加了操作步骤和时间。采用新型的

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