蛋白质的透析实验PPT.pptVIP

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蛋白质的透析实验PPT

——蛋白质的透析 透析实验 实验原理 透析是膜技术的一种,利用透析膜可以选择性的透过一定大小分子,从而将待分离纯化的物质和杂质离子分离开。 常见的透析有:蛋白质的透析和糖类的透析。 实验原理 透析是利用半透膜进行的一种选择性扩散操作,通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。 实验原理 把需要透析的样品盛于透析袋内,袋内留有挤去空气的空余部分,以防由于溶剂渗入造成样品体积增加而引起透析袋胀破 为了获得较快的透析速度,常常采取一些措施保持膜两侧浓度差具有最大差,如经常更换透析外液,连续搅动外液 透析装置 透析装置和透析过程示意图 实验仪器 磁力搅拌器 蛋白质的透析 取10~15mL蛋白质氯化钠溶液,装入处理好的透析袋中,扎紧两端,浸入蒸馏水烧杯中进行1~2h的透析 用硝酸银检测烧杯中透析液是否有氯离子存在?用双缩脲法检测是否有蛋白质存在? 透析完全后,检测透析袋内是否存在蛋白质和氯离子? 注意:透析完全时,透析袋内会出现球蛋白沉淀,因为球蛋白不溶于纯水。 思考题

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