乙肝六项操作及检验结果的解释PPT.pptVIP

;乙肝六项操作HBSAg (双抗体夹心法）;乙肝六项操作HBSAg (双抗体夹心法）;乙肝六项操作HBSAg (双抗体夹心法);乙肝六项操作HBeAb检测（ELISA)竞争法;乙肝六项操作HBCAb测定（竞争法）;乙肝六项操作HBCAb测定（竞争法）;乙肝六项操作HBCAb-lgM(捕获法）;乙肝六项操作HBCAb-lgM(捕获法）;乙肝六项操作HBCAg-lgM(捕获法）;乙肝六项操作HBCAb-lgM(捕获法）;ELISA法检测乙肝六项的注意事项 及结果分析;1 样本的采集与处理影响;1.2 正常血液采集后半个小时至两小时开始凝固， 有时工作中为了快速检测 ，常会在血液未开始凝固时 ，即强行离心分离血清 。 特别是在冬天 使得血清中残留部分纤维蛋白原，在 ELISA 测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白凝块附着在酶标反应孔壁内使得不易洗掉 易造成假阳(阴)性、 影响结果 。 因此血液标本采集后要使其充分凝固后再分离血清，标本离心时 ，可加大离心转速 ，延长离心时间 或者要节约时间就用带分离胶的采血管采集标本。;1.3 血清标本应避免细菌污染， 细菌的一些内源性酶本身会对相应酶作标记测定方法产生干扰。;2 试剂的影响;2.2 不同厂家出产的试剂特异性和敏感性不相同。 有的厂家酶标板空间 A 值差 15% ，标记酶活性及显色液的稳定性较差，使用劣质试剂必然导致结果的假阳性或假阴性 。 选择高质量的试剂是保证检验结果准确的关键之一;3 操作技术的影响;3.2 温浴影响 96 孔酶标板结构特别 ，易产生边缘效应 ，抗原抗体结合及酶促反应对温度要求严格， 标本要贴好密封膜 ，防止水蒸气和污物浸入， 放置 37 ℃水浴箱时 ，应让反应孔底部 2/3 浸入水中， 才能减少受热不均 避免边缘效应 ，干浴与水浴存在明显的差异 ，尽可能使用水浴 ，并控制好水浴时间。;3.3 洗涤是 ELISA 法操作的重要环节， 洗涤液的配制要严 格按照说明书进行操作 ，不能用自来水代替蒸馏水配制 因为自来水中的次氯酸钠会影响结果 ，手洗易交叉污染 尽量使用洗板机洗涤， 血清中残留的纤维蛋白或洗涤瓶，未经常清洗而留有的污垢 ，结晶易使洗板机针孔全堵塞或半堵塞 ，造成未结合标记酶洗脱不彻底， 导致花板而造成假阳性或假阴性 ，所以操作洗板机过程中要不时观察洗板机针孔内洗液的通畅情况 ，及时纠正调整， 洗板机要做好维护保养， 不用时应用去离子水清洗几遍。;3.4 显色剂应避光保存 滴加显色剂 A 、B 时 ，顺序不能颠倒 ，注意不要漏加， 显色时间要严格控制， 可用计时器来计时，保证准确， 肉眼判断结果时， 显色浅不易观察， 影响结果准确性， 必须使用酶标仪检测结果， 以保证结果一致性 ，滴加终止液后随着时间的增加， 吸光度值逐渐下降， 而且浓度越高其 吸光度随时间下降越快， 可能会产生假阳性或假阴性结果，建议在终止反应后立即比色。;4 钩状效应(Hook)影响;有学者认为大约 40%的人血清标本中含有非特异性干扰物质 ，可以不同程度影响检测结果 ，常见的干扰物质有： 类风湿因子、 补体、异嗜性抗体 、治疗性抗体 、溶菌酶、总蛋白浓度等， 某些自身抗体都会影响结果造成假阳性。;6 药物的影响;乙肝表面抗原前S1;乙肝核心抗体临床意义;常见乙肝六项检验结果的解释;HBsAg;乙肝五项常见模式; 4 - + - - - (1)注射过乙肝苗有免疫； （2)既往感染；③假阳性。 5 - + - + + 急性HBV感后康复。 6 + - - - + (1)急性HBV感染； (2)慢性HBsAg携带者； (3)传染性弱。 7 - + - - + 既往感染，仍有免疫力。 HBV感染，恢复期。 ;乙肝五项常见模式;谢 谢！