流感病毒感染介导的免疫病理损伤研究.docVIP

精品论文 参考文献 流感病毒感染介导的免疫病理损伤研究 聂贵军(吉林省敦化市中医院病理科 133700) 　　【摘要】目的：探讨流行病毒感染介导引起的免疫病理性损伤进行研究。方法：对病毒感染小鼠的感染细胞凋亡情况行免疫组织化学染色法进行观察，并采用乳酸脱氢酶释放法对感染的小鼠脾淋巴细胞CTL杀伤活性以及NK活性。结果：小鼠因缺乏穿孔素可使流感病毒在其肺部进行大量繁殖，并增加患者的病毒清除时间，感染的病毒细胞因缺乏穿孔素引起细胞凋亡周期延长。检测小鼠脾脏细胞中的CTL杀伤活性以及NK活性均发生明显降低。结论：流感病毒感染介导应用的穿孔素对初次病毒感染具有显著的效果，能够快速的清除感染的病毒，值得临床上推广应用。 　　【关键词】流行病毒感染 介导治疗 穿孔素 　　【中图分类号】R36 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2014）25-0045-02 　　流行病毒作为一种重要的病原体作用在呼吸道,导致流感病毒感染。有调查显示[1]，近年来，流感病毒传染呈现每年都会呈现周期性的流行性传播。其中甲型流感病毒属于正粘病毒是一种反义单链分节段的RNA病毒，随着病毒的深入和不断变化则如何使病毒快速被清除成为了现今医学界的热点研究的课题[2]。 　　1、资料和方法 　　1.1一般资料 获得人类流感病毒H1N1（A/PR/8/34）的小鼠适应株，并将常规实验室贮存的病毒菌株接种在10d龄的鸡胚胎的尿囊腔中，在37℃下进行3d培养，并在3d后收集感染的鸡胚胎尿囊液。利用猴肾细胞株在感染病毒后易形成空斑数目的原理，对其尿囊液中的病毒滴度[3]。同时，选取穿孔基因敲除鼠和C57BL/6小鼠各30只，其中所有小鼠均为8～10周龄的成年雄性小鼠。将小鼠经腹部用药苯巴比妥对其进行轻度麻醉，并将A型流感病毒通过小鼠的左鼻进行接种感染。 　　1.2方法 免疫组化技术检测流感病毒抗原和凋亡细胞 应用DAKO试剂盒(DAKO Envision+TM, CA,USA),过氧化物酶染色法检测肺组织切片中A型流感病毒PR8抗原。抗流感病毒特异性抗体为兔抗PR8多克隆抗体,来源于用纯化流感病毒A/PR/8/34免疫的新西兰大耳白兔,血清抗体工作浓度为1B400。显微镜下观察病毒抗原的分布这些结果表明，局部的AMs与中性粒细胞浸润在流感病毒感染的总体致病中发挥作用，同时，它们在控制病毒生长及促进病毒清除的过程中也发挥着至关重要的作用．因此，在高致病性流感病毒感染过程中，AMs 与浸 　　润的中性粒细胞可以增加细胞因子的产生，进而加重肺部的炎症并趋化相关的单核 / 巨噬细胞及 T 淋巴细胞至肺组织．尽管这些将导致严重的病理损伤，但这些反应也可能防止宿主发生流感病毒诱导 　　1.3统计处理 将笔者在实验过程中获得的数据输入spss16.0统计学软件中进行处理。其中计量资料采用t检验。若检验结果plt;0.05，说明两种不同的病例技术之间差异具有统计学意义。 　　2、结果 　　小鼠因缺乏穿孔素可使流感病毒在其肺部进行大量繁殖，并增加患者的病毒清除时间，感染的病毒细胞因缺乏穿孔素引起细胞凋亡周期延长。检测小鼠脾脏细胞中的CTL杀伤活性以及NK活性均发生明显降低。具体结果见表1～表2。 　　表（1）小鼠进行流感病毒感染0、2、3、5、8d后NK活性的情况（x-plusmn;s%） 　　 感染流感病毒的天数（n） 小鼠个数（n） NK活性的变化(x-plusmn;s % ) 　　 0 50 5.9plusmn;8.2 　　 2 50 15.3plusmn;1.9 　　 3 48 30.1plusmn;1.4 　　 5 48 11.4plusmn;2.1 　　 8 47 6.9plusmn;4.2 　　表（2） 小鼠进行流感病毒感染0、5、8、10、12d后CTL杀伤细胞活性情况（x-plusmn;s%） 　　感染流感病毒的天数（n） 小鼠个数（n） 脾淋巴细胞CTL杀伤活性（x-plusmn;s%） 　　 0 50 3.8