高效毛细管电泳分析羊栖菜多糖对肿瘤机体红细胞合淌度的影响研究.pdfVIP

第七届全国毛细管电泳及相关微纳分离分析学术报告会文集 上海 高效毛细管电泳分析羊栖菜多糖对肿瘤机体 红细胞合淌度的影响 季宇彬1,2王种2吴涛2汲晨锋1,2+ (1．哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研发中心，黑龙江哈尔滨150076； 2．哈尔滨商业大学药物研究所博士后科研工作站，黑龙江哈尔滨150076) 摘要：目的分析羊栖菜多糖对肿瘤机体红细胞合淌度的影响。方法建立肿瘤动物模型，分高、中、 低剂量腹腔给与羊栖菜多糖7天，采集并制备红细胞悬液，应用高效毛细管电泳法检测红细胞合淌 度。实验条件：毛细管规格：75lam×50cm；电泳缓冲液为含羟丙基甲基纤维素的磷酸盐溶液(O．1 7．4)；进样压力3．448 s；分离电压20 mol／L，pH kPa；进样时问10 kV；柱温25℃。结果羊栖菜多糖能降 低肿瘤机体红细胞的电泳迁移时间，增加红细胞的合淌度，三个剂量组(高、中、低)的红细胞合淌度 与阴性对照组和正常组相比均有非常显著差异(P0．01)。结论羊栖菜多糖能够改变肿瘤机体红细胞 合淌度并使之趋向于正常机体水平，这可能与其改变红细胞表面的电荷密度有关。高效毛细管电 泳法可以作为检测红细胞生理状态和功能的一种辅助工具。 关键词：高效毛细管电泳；羊栖菜多糖；红细胞；合淌度 1前言 毛细管电泳可以将细胞当作“离子”看待，分离细胞等物质，既能研究一批细胞样品也能研究 一个细胞，与其他经典电泳技术相比，具有高灵敏度、高分辨率、高速度、进样量小、成本低、应 用范围广、易于实现全程自动化等优点¨2】。不少疾病如肿瘤、风湿或某些炎症，可以引起血红细胞 电迁移速度变大，由此可进行临床诊断。利用CE进行此类研究，只需测定出峰时间并比较患者和健 康细胞的差异即可[3】。但目前为止，关于肿瘤机体与正常机体红细胞淌度问差别的报道还比较少。本 实验以高效毛细管电泳法测量了羊栖菜多糖作用下肿瘤机体红细胞合淌度的变化。 2实验部分 2．1材料、试剂及仪器 磷酸氢二钾，磷酸二氢钾均为分析纯；羟丙基甲基纤维素 2．1．2仪器P／ACE SystemMDQ毛细管电泳仪(美国Beckman公司)，离心机 2．1．3实验动物及瘤株昆明种小鼠，体重20士2．0 g，雌雄各半，由哈尔滨医科大学动物实验中心提 供：S180(肉瘤)购自黑龙江省肿瘤医院。 2．2方法 2．2．1小鼠肿瘤模型的建立 将接种后7天生长良好的S180小鼠，颈椎脱臼处死，固定于蜡版上，腹部皮肤消毒后，剪开并 剥去腹部皮肤，用高温消毒过的注射器抽取腹水，放入无菌容器内，置冰块中保存。腹水用无菌生 mL。 理盐水按l：4稀释，作腋下部位注射接种，每鼠注射接种0．2 2．2．2实验分组、给药剂量及途径 小鼠随机分为6组，每组10只。分别为实验组：SFPS高、中、低剂量组：阳性对照组：5一氟尿 嘧啶组：阴性对照组：生理盐水组：正常对照组。高、中、低剂量组剂量分别为40mg／(kg．d)、20 mg／(kg．d)、10mg／(kg．d)，阳性对照组剂量为25mg／(kg．d)，阴性对照组和正常对照组均给予相同体积 37 第七届全国毛细管电泳及相关微纳分离分析学术报告会文集 上海 h 的生理盐水。于接种24小时后开始腹腔给药，每只小鼠0．2mL／次，每天1次，连续7天。停药24 后眼球采血(用肝素抗凝)。 2．2．3红细胞悬液的制备 r／min离心5min，洗涤4次。准确吸取红 新鲜血液加3倍体积PBS(0．9％NaCI，pH7．2)，3000