PCR微孔板液相杂交检测深部致病真菌实验性研讨.pdfVIP

指导小组成员 李红宾 副教授 黄云莉 主管技师 董天样 主治医师 昆明医学院硕士研究生论文 PCR-微孔板液相杂交检测深部致病真菌 实验性研究 摘 要 目的 探索建立一种快速、敏感、特异检测深部真菌方法。 方法 以5，端标记有生物素来源于真菌28SrDNA保守序列的真菌通用引物对三属九 种真菌进行PCR扩增后，分别进行琼脂糖电泳和与5’端标记有地高辛的真菌通用探针 或种特异性探针在PCR仪上900C2分钟，550C1分钟进行液相杂交，并将杂交产物固 定于链亲和素包埋的微孔板中，经酶标抗地高辛抗体结合，底物显色。 结果 1.真菌通用引物可广谱地扩增九种真菌，扩增片段为260bp，与文献报告一致。