第13章 免疫组织化学技术(二).pptVIP

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  • 2018-01-07 发布于广东
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第13章 免疫组织化学技术(二)

优点: 敏感性高 特异性高 一抗和二抗工作浓度低 操作时间缩短 可以多重标记 缺点: 有些组织如肝、肾、白细胞、脂肪组织和乳腺等有内源性生物素活性,需要对组织进行预处理 ?ABC复合物在中性时带正电荷,容易与细胞核等带负电荷结构非特异结合亲合素为糖蛋白,可以与凝集素等碳水化合物结合 桥联亲合素-生物素技术 Bridged Avidin-Biotin technique, BRAB 原理:是以游离的亲合素作为桥联剂,利用亲合素的多价性,将检测反应体系中抗原、生物素化抗体复合物与标记生物素联结起来,达到检测反应分子的目的。 由于生物素化抗体分子上连有多个生物素,因此,最终形成的抗原-生物素化抗体-亲合素-酶标生物素复合物可积聚大量的酶分子;加入相应酶作用底物后,即会产生强烈的酶促反应,从而提高检测的灵敏度。 标记生物素-抗生物素技术 Labelled Avidin-biotin technique,LAB 原理:以标记亲合素直接与免疫复合物中的生物素化抗体连接进行检测。 特点: 相当高的灵敏度, 省略了加标记生物素步骤,操作较BRAB法简便。 间接LAB法采用生物素化第二抗体,可进一步提高 检测灵敏度 二、葡萄球菌A蛋白法 定义:葡萄球菌蛋白A/SPA是一种从金黄色葡萄球菌细胞壁分离的蛋白质,由于它能与多种动物IgG的Fc

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