微生物的遗传育种-杂交育种.ppt

项目二 微生物的遗传变异和育种( Microbial genetics and breeding ) 任务四 杂交育种 一、杂交育种的目的 1、杂交育种的定义 杂交育种是指将两个基因型不同的菌株经吻合（或接合）使遗传物质重新组合，从中分离和筛选具有新性状的菌株。 2.杂交育种的目的 2.转化作用 ⑴定义 转化（transformation）：受体细胞直接吸收来自供体细胞的离体DNA片段，并通过交换把它整合到自己的基因组中，从而获得了供体细胞的某些遗传性状的现象。获得新性状的受体称为转化子（transformant）。 ⑵转化过程 3.转导作用 ⑵转导的类型 ①普遍性转导（generalized transduction） ②局限性转导（specialized transduction） 1. 有性杂交 有性杂交是指不同遗传型的两性细胞间发生的接合和随之进行的染色体重组，进而产生新遗传型后代的一种育种技术。 3. 原生质体融合 2.培养基的选择 谢 谢！ 1.杂交育种中亲本选择 ⑴原始亲本的选择 ⑵直接亲本的选择 发酵培养基 3.杂交育种的遗传标记 4.杂交育种方法 常规杂交育种 微生物常规杂交形式 原生质体融合育种 发酵工业的优良菌种的选育主要采用诱变育种方法。但是，一个菌种长期使用诱变剂处理之后，其生活能力一般要逐渐下降，例如生长周期延长，孢子量减少，代谢减慢，产量增加缓慢，诱变因素对产量基因影响的有效性降低等。因此，有必要利用杂交育种方法。 杂交的意义： 第一，通过具有不同遗传性状菌株的杂交，使遗传物质进行交换和重新组合，改变亲株的遗传物质基础，扩大变异范围，使两亲株的优良性状集中于重组体内，获得新品种。 第二，通过杂交后获得具有新遗传特性的重组体，不仅可克服因长期诱变造成的生活力下降，代谢缓慢等缺陷，也可以提高对诱变剂的敏感性，降低对诱变剂的“疲劳”效应。 第三，通过杂交可以总结遗传物质的转移和传递规律，丰富并促进遗传学原理的发展。 杂交的目的在于使双亲或多亲的遗传物质重新组合，以获得综合双亲或多亲优良性状的新品种。 杂交育种（breeding by hybridization) 是国内外广泛应用并卓有成效的育种方法。目前在生产上大面积推广种植的农作物的品种绝大多数都是用杂交育种的方法育成的。 这也是一类重要的微生物育种手段，比起诱变育种，它具有更强的方向性和目的性。 真核微生物杂交方式：有性杂交、准性杂交和原生质体融合等。 其主要过程为 a.菌丝联结；b.质配（形成异核体）；c. 核配； d. 单倍体化 准性生殖常见于某些真菌，尤其是半知菌中。在原核和真核生物中均有存在 准性杂交的方式主要有结合、转化和转导，其局限性在于等位基因的不亲合性。 ② 选择：主要根据杂交目的。 选择产量高、代谢快、产孢子能力强、无色素、泡沫少、粘性小等发酵性能好的菌株为原始亲本。 它们可以来自生产用菌或诱变过程中的某些符合要求的菌株，也可以是自然分离的野生型菌株。 ③ 标记特征：原始亲本还应该具有野生型遗传标记，如抗性标记等性状。 由于杂交育种重组频率极低，一般为10-7左右。杂交后的混合体系中除了极少数重组体外，还存在大量的未杂交亲本及无效杂交后代，增加重组体筛选难度。为了提高效率，加快重组体筛选和检出，让杂交亲本带上不同的遗传标记是十分重要的。但实际工作中大多数亲本无野生型遗传标记,一般是由原始亲本菌株经诱变剂处理后选出的具遗传标记,又通过亲和力测定的直接用于杂交的菌株.一般杂交亲本用营养缺陷型或抗药性突变型等遗传标记,作为选择重组体的标准和依据. 由于多数微生物尚未发现其有性世代，因此，直接亲本菌株应带有适当的遗传标记。常用的遗传标记有颜色、营养要求和抗药性等。 营养标记菌株（即营养缺陷型菌株）是最常用的遗传标记之一。 所谓营养缺陷型菌株是微生物经诱变剂处理后产生的一种生化突变体。由于基因突变，它失去了合成某种物质（氨基酸、维生素或核苷酸碱基）的能力，在基本培养基上不能生长，大多数营养缺陷型菌株需要补加一定种类的有机物质后才能生长。 2．抗性标记(高温、高盐、高pH) 3．温度敏感性标记 4．其他性状标记 如孢子颜色、菌落形态结构、可溶性色素舍量、代谢产物产量高低和代谢返速度快慢等，以及利用的碳、氮原种类、杀伤力等其他性状都可以作为重组体检出的辅助性标记。 转化不是两个细胞的直接接触，而是供体细胞的离体DNA与受体细胞直接接触而转移遗传物质。 发现 1951年，Joshua Lederberg和Norton Zinder为了证实大肠杆菌以外的其它菌种是否也存在接合作用，用二株具不同的多重营养缺陷型的鼠伤寒沙门氏菌进行类似的实验，他们发现二株营养缺陷型混合培养后确实产生了