真菌类的遗传分析.docVIP

第七节 真菌类的遗传分析 　　(Neurospora crassa)和酵母菌(Saccharomyces)都是真菌，属于低等真核生物。粗糙脉孢菌具有以下几方面的优点而成为遗传分析的好材料： 　　1 　　2 　　3 　　4 　　7条染色体。野生型粗糙脉孢菌的分生孢子有两种，小型分生孢子中含有一个核，大型分生孢子中含有几个核。分生孢子萌发，菌丝生长，形成菌丝体，菌丝再长出分生孢子散布开去，继续无性繁殖周期。 　　(A)的分生孢子落在另一种接合型菌株(a)的子实体的受精丝上(或者相反的情况：因为两种接合型的菌株都能产生分生孢子和子实体)。分生孢子中的细胞核进入子实体的受精丝中，形成接合型的异核体。经过多次有丝分裂以后，两种接合型的细胞核在子囊(ascus)中融合成为合子核(2n)。接着合子核在子囊中进行减数分裂，结果使每一个二倍体核产生4个单倍体核。每一单倍体核接着又进行一次有丝分裂，结果使每一成熟的子囊中含有8个子囊孢子，其中邻接的每一对孢子具有相同的基因型。 　　一、顺序四分子及其遗传分析 　　4个产物保留在一起，称为四分子(tetrad)，但是，子囊的外形是如此的狭窄，以致分裂的纺锤体不能重叠，只能纵立于它的长轴之中，这样一来，所有分裂后的核——8个子囊孢子都从上到下顺序排列成行，可以推知，第一对子囊孢子来自一条染色单体，第二对子囊孢子则是来自这条染色单体的姊妹染色单体；第三和第四对子囊孢子是来自前一条染色体的同源染色体的姊妹染色单体。所以，脉孢菌减数分裂所产生的四分子是属于顺序四分子(orderedtetrad)图3-19。 　　(locus)，计算某一基因与着丝粒的重组率，即着丝粒作图。②子囊中子囊孢子的对称性，证明减数分裂是一个交互过程。③可以检验染色单体的交换有否干涉现象，还可利用它来进行基因转变(gene conver-sion)的研究。④证明双交换不仅可以包括4线中的两线而且可以包括3线或4线。 　　()着丝粒作图(centromere mapping)利用四分子分析法，测定基因与着丝粒间的距离称为着丝粒作图。着丝粒作图是基于这样的事实：在一对非姊妹染色单体间没有发生着丝粒和某杂合基因座交换的减数分裂和发生了交换的减数分裂，其产物四分子中的等位基因在排列方式上是不同的。前者称为第一次分裂分离(first-division segregation)或叫MⅠ模式；后者称为第二次分裂分离(second-division segregation)或称为MⅡ模式。以粗糙脉孢菌接合型 A、a 为例分别说明上述概念的由来，如图3-20所示。 　　3-20中可知8个子囊孢子呈AAAAaaaa(或aaaaAAAA)的排列是如何产生的。因为没有纺锤体的重叠，携带A和a的核在子囊中互不干扰，同时，尽管等位基因A和a同处于二倍体的性母细胞中，减数分裂的第一次分裂就将A和a分离开，并且在减数分裂Ⅱ中依然保持这种分离状态。这种情况就是第一次分裂分离，或MⅠ模式。图3-21显示的是第二次分裂分离的染色体行为：当非姊妹染色单体在着丝粒和基因座(A，a)间发生交换时，等位基因A和a在减数分裂第一次分裂后仍同时存在于同一核中，因为在这个过程中，只有同源染色体的分离，而染色体各自的着丝粒没有分开，待到第二次分裂(减数分裂Ⅱ)时，A和a才进入不同的核中，这种情况称为第二次分裂分离。由此得到的等位基因的排列模式AAaaAAaa(或它的镜像排列aaAAaaAA)称为MⅡ模式。这种模式的特征是在一半的四分子产物中发生了重组。这种交换型排列模式还有可能出现AAaaaaAA(或aaAAAAaa)，这是由于纺锤体的随机趋向的机制，使得“A上a下”和“A下a上”或“A下a上”和“A上a下”，而且二者的频率也大致相当。 　　(ly-sine)的野生型菌株(记作lys+或+)，该菌株成熟的子囊孢子呈黑色。另一种是赖氨酸缺陷型(记作lys-或-)，这种菌株的子囊孢子成熟较迟，呈灰色。将这两种菌株进行杂交lys+×lys-。在杂种子囊中减数分裂的产物，根据黑色孢子和灰色孢子的排列次序可有6种子囊型，为方便起见只写出其中的4个孢子对(spore pairs)，其计数的结果在表3-7中。 　　3-7中的(1)和(2)两种类型的子囊中其子囊孢子的排列方式互为镜影，同样(3)和(4)，(5)和(6)也互为镜影，说明减数分裂是一个交互过程。从图3-20、21可以推知，第一次减数分裂(MⅠ)时，带有lys+的两条染色单体移向一极，而带有lys-的两条染色单体移向另一极。这样，就lys+／lys-这一对基因而言，在第一次减数分裂时就发生了分离，所以子囊型(1)和(2)属于第一次分裂分离类型。进入第二次减数分裂时，每一染色单体相互分开，所以在每一子囊中两个lys+的孢子排列在一起，两个lys