番鸭花肝病暂定名病原的分类地位研讨.pdf

916 2004学术年会 番鸭花肝病(暂定名)病原的分类地位研究+ 王林川1，陈庆华1，徐昌领1，鄢志强1，陈芳艳1，王政1，何辉1，赵赣】 王丙云2，计慧琴2，冯军2，刘富来2 1华南农业大学，广州510642；2佛山科学技术学院，佛山528000 摘要：本文对从广东、福建分离的番鸭花肝病(暂定名)病毒的7个分离株进行了细胞蚀斑纯 化、部分生物学特性鉴定、人工发病、电镜观察、病毒核酸PCR／RT—PCR检测及部分核苷酸序列分 析，确定我国的番鸭花肝病(暂定名)的病原有两类：一类为呼肠孤病毒感染，另一类为细小病毒 感染，两类病原可单独引发疾病；其中后者是国内外对该病原的首次确认，并就番鸭花肝病(暂定 名)病原的起源作了调查及探索。 关键词：番鸭花肝病(暂定名)；细小病毒型病毒；呼肠孤病毒 1997年以来，福建、浙江和珠江三角洲，包括佛山、南海、东莞等地的番鸭相继发生临床上以 软脚为主要症状，以肝、脾表面有多量小白点、。肾脏肿大、出血、表面有黄色条斑为主要病理变化 简称MDSH))”，也称“白点病”。多年来，就该病的流行病学、临床症状、病理变化等，国内同行 专家学者的报道基本一致，但对该病的病原学的研究结果报道在国内确较为混乱，如：(1)2000 年，吕殿红等(广东省农科院兽医所)对番鸭“花肝病”的研究表明：该病病原为病毒，应用2日 龄和8日龄雏番鸭肌肉注射能做出动物回归试验，血凝试验表明该病毒对鸡红血球具有凝集性，对 鸭红血球的凝集性较弱，小鹅瘟血清对该病无交叉免疫保护力；临床治疗试验应用高免卵黄抗体效 果良好；推测该病病原为一种新的病原或细小病毒的变异株；2001年，黄庚明、吕殿红等进一步确 学研究表明该病为病毒性疾病，核酸类型为双股DNA的病毒，将该病毒划入疱疹病毒科；该病毒 与鸭瘟病毒、鸭出血症病毒(暂定名为鸭疱疹病毒Ⅱ型)无抗原相关性，故暂定名为鸭疱疹病毒III型； 娄华等(佛山科技学院农牧分院)也分离鉴定到疱疹病毒。(3)2001年吴宝成等(福建农业大学) 报道其分离鉴定的病毒是一种核酸型为RNA的病毒，认定为呼肠孤病毒科正呼肠孤病毒属番鸭呼 肠孤病毒；2002年黄安国等(广西区农科院兽医所)也分离鉴定到呼肠孤病毒；2002年，黄瑜等(福 建省农科院兽医所)又发表研究简报提及病原为呼肠孤病毒。(4)2001年冯健等对雏番鸭“花肝病” 进行病理学研究：认为“花肝病”有可能是由于番鸭接种鸭病毒性肝炎疫苗诱发感染所致的综合征1。 由于国内已有的文献报道中都未提及国外是否有本病的发生，都是以一种新病来报道，同时国外的 疫苗、兽药生产和经销公司也从未提供过相应的疫苗或药物来防治；针对国内病原研究结果报道的 不一致，可以说：对番鸭花肝病(暂定名)新病毒病原的鉴定及分类地位的确定的研究，是反映国 内兽医研究真实水平的一个重要标志。 在国家自然科学基金项目的资助下，本课题组已做了一些工作：(1)到国内首先发生、发现该 病的福建莆田调查本病的起源：据长期饲养番鸭的养殖户反映，该地最先发生番鸭花肝病(暂定名) 的番鸭是在1997年莆田某种鸭场中的法国引种鸭与当地土鸭杂交再回交的第三代商品番鸭(苗)， 随后扩散，由于当时莆田年出雏番鸭苗超过6千万只，鸭苗分发到福建、广东、广西、浙江等省区 各地，引发该病在国内各地暴发；(2)跟国外专家学者对该病及其病原的学术讨论与研究，了解到 ’本研究为国家自然科学基金资助项目(批准号 2004学术年会囝9，7 毒分离出并鉴定为呼肠孤病毒，其中法国VJestin教授的实验室做了较多的工作；德国的 际上常将此病称为番鸭的呼肠孤病毒感染(moviralinfection Duck)。(3)目前已从广东、 ofMuscovy 福建等地亲自分离到7株能人工发病的病毒株；其中1株经细胞蚀斑克隆技术纯化、易感动物人工 发病及回归分离病毒试验、电镜观察、理化及生物学特性鉴定、核酸PCR及序列分析，确定为细小 病毒；其它6毒株鉴定为呼肠孤病毒。现将我们的研究工作报告如下： 1材料与方法 1．1材料 1,1。1病料：广东省佛山市、渍远市、惠≯}l市、福建省甫田市番鸭养殖场送检病料。 1．1．2健康无母源抗体雏番鸭、番鸭胚：购自广州番禺某种番鸭场，经生产记录查