百合授精前障碍机理的研讨.pdf

百合授精前障碍机理的研究 刘春穆鼎 明军 董玲 (中国农科院蔬菜花卉研究所花卉室， 北京100081) 摘要：百合授精前障碍是影响百合种闯杂交成功的重要原因。本研究对百合花粉的活力、萌发力、储 藏条件及授粉方法进行r深入研究，结果表明百合花粉萌发适宜的蔗糖浓度为10％，Ca2+对百合花粉萌发 的作用随品种不例而有差异，花粉储藏适宜温度为5℃，不同的授粉方式影响花粉的萌发，授粉后48小时， 切花柱方式的花粉处于不萌发状态，试管授精是克服百合种间杂交有效的方法，授粉24小时，花粉管即 可进入胚珠，45天果实明显膨大。 关键词：百合；授精前障碍；活力：萌发力；切割柱头 百合属(Lilium)包含85个种，分成7组(De1974)，其中商业价值较高的栽培品种主要来 Jong 自于百合组(Leucolirion)中的亚洲百合杂种系AsiatiC Hybrids，东方百合杂种系OrientalHybrids。目前百合的常规育种主要集中在上述三个杂种系之间 以及与其他组的一些种的杂交，围绕着花色、花香(对东方百合减弱香味，对亚洲百合增加香味)、花 形、花期、株型等观赏性状的改良，以及抗病、耐寒、耐热、耐弱光、缩短生长周期、延长瓶插寿命、 无花粉等方面进行育种。植物种间杂交障碍主要分为授精前和授精后障碍(GL．Stebbins1958)。授 精前障碍主要表现在花粉不萌发或花粉管在花柱内不能正常生长，目前克服的方法主要是切割花柱 (J，M．Van 1988)方式。一旦授精作用完成，又会发生杂种胚发育不完全或中途败育，即授精后 Tuyl Asano 障碍，通过胚抢救可以克服(J．M．Van1986，Y 1980)。本实验对百合品种花粉活力、萌发 Tuyl 力进行测定，对花粉管在子房内的生长情况、不同授粉方式对花粉萌发的影响及试管授精技术进行探 讨，旨在为克服百合种间杂交授精前障碍提供理论参考和实际指导。 1．材料与方法： 1．1花粉活力、花粉萌发力测定 花粉活力采用孔雀绿一酸性品红一桔红G混合试剂染色法(陈家瑞1991)，供试品种为山丹(L． 液于载玻片上，将少许花粉埋入染色剂中，保持湿度，在室温放置7—8小时，显微镜F镜检、计数， 每个品种取三个视野观察。 花粉萌发力测定采用以蒸馏水为对照，设蔗糖浓度为7％、10％、13％、16％、20％，硼酸浓度 为O．01％o，采用正交设计，选出昂佳组合，加入300mgn。的硝酸钙观察钙离子是否对花粉萌发具有促 进作用。 1，2不同储藏温度、时间对花粉活力、萌发力的影响 选取山丹(L 采用1．1方法测定这些花粉的活力和萌发力。 1．3不同授粉方法对花粉萌发、生眭及授精的影响 开花前一天将铁亚杂交品种达诺(CebDazzle)的花朵去雄并套袋，经4—5天后，当柱头分泌粘 液时，授以白狐新鲜花粉。采用两种授粉方式，一是将花粉直接授于柱头上，二是住子房上部3ram处 以50％酒精清洗三次，每次10分钟。然后将样品放于o．5N NaOH溶液中，60C条件下进行软化至全 bule)的0．1N磷酸钾 部呈透明状，再以蒸馏水漂洗三次去除NaOH，放入含0．29m苯胺蓝(aniline and (K3POD中进行染色3小时以上，将染色完全的材料置于载玻片上，并用载玻片挤压(KhoBear, 1968)，利用荧光显微镜观察、照相记录。 试管授糟：取4—5∞长铁弧杂交品种维多利亚瀑布(VictoriaFalls)、白狐的花蕾，冲洗干净后， 放入O．1％升汞溶液中消毒8分钟，蒸馏水冲洗三遍后，在操净j二作台上去掉花瓣，接种在含有 3mm处切掉，授向狐花粉，按照与植株授粉相同的方法，进行取样、同定、观察和照相。 2．结果与分析： 2．1蔗糖浓度、钙离子对百合花粉活力、萌发