甘蔗SPS家族基因表达分析及SPSⅢ可变剪接的研讨.pdfVIP

中文摘要 中文摘要 蔗糖磷酸合成酶是蔗糖代谢中的关键酶之一。本研究涉及甘蔗SPS家族基因表 达分析及SPSIII选择性剪接的研究2个方面的内容。 I、SPSII、SPSIII、 用实时荧光定量PCR测定出蔗糖磷酸合成酶基因家族(SPS SPSIV、SPSV)的相对表达量。测定时期为甘蔗糖分积累期早期、中期和后期；测 定组织部位为甘蔗未展开幼叶、第三功能叶和不同部位的蔗茎。定量PCR结果显示： 在甘蔗糖分积累期的不同阶段，蔗糖磷酸合成酶家族基因各成员在两个品种的 不同组织部位中绝大多数表现为差异极显著，少数表现为差异显著，极少数表现为 差异不明显。此外，在甘蔗糖分积累期，蔗茎中蔗糖磷酸合成酶基因的相对表达量 早期处于较高水平，随后逐渐降低。而在主要光合组织中，蔗糖磷酸合成酶基因的 相对表达量一直保持较高水平。 2、两个甘蔗品种的蔗茎中蔗糖含量增加最明显的部位是第9、14节。茎第18 节中蔗糖含量的相对增加量在低糖品种明显高于高糖品种。 段克隆到载体，通过定点突变获得缺失突变体。将缺失突变成功的基因片段连接至 载体pBll21，成功构建来了4种植物表达载体。通过农杆菌介导的方法转化模式植 物拟南芥，实验进入抗性苗筛选阶段。为研究甘蔗SPSIII基因第9外显子缺失这种 剪接模式做好了前期准备。 关键词：甘蔗；蔗糖磷酸合成酶基因；可变剪接；荧光定量PCR,定点突变 Abstract Abstract one in metabolism．The Sucrose of phosphatesynthase(SPS)iskeyenzymessugar research focusedon ofSPS familiesandaltemative mainly expressiongene splicing from ofSPSlffPre-mRNA analysis sugarcane． lateofaccumulate ofeachof the and expression 1．Duringearly,mid sugar,relative different thefiveSPS I、SPSII、SPSIII、SPSIV、SPSV)inthe families(SPS gene tissuesof wasdeterminedreal—timePCR．Two varietiesWere sugarcane by sugarcane FN95—1 differenttissuesof Were ROC-5(10w sugarcane 702(highsugar)and sugar)．The and ofthecane．Real—time thirdfunctionofleavesfourdifferent youngleaves，the