双峰驼天然重链抗体可变区酵母双杂交文库的构建与鉴定.PDFVIP

双峰驼天然重链抗体可变区酵母双杂交文库的构建与鉴定.PDF

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畜牧兽医学报 双峰驼天然重链抗体可变区酵母双杂交文库 的构建与鉴定 胡湘云高小龙付向晶刘丹丹范文涛王燕平杜恩岐王兴龙党如意杨增岐 西北农林科技大学动物医学院杨凌 摘 要构建双峰驼天然重链抗体可变区 酵母双杂交文库并对文库质量进行鉴定采集未经免疫的 月 龄雌性双峰驼外周血骨髓脾和淋巴结并从外周血中分离淋巴细胞抽提总 反转录为 用 对引物 经过 轮 扩增得到 左右的双峰驼 片段根据 公司 使用手册将带有同源臂的 片段与线性化的 质粒共转化 酵母感受态细胞转化 产物涂布 平板 倒置培养 后收集平板上的所有克隆即为双峰驼天然重链抗体可变区酵母 双杂交文库对文库的滴度重组效率及多样性进行鉴定结果显示本研究构建的双峰驼天然重链抗体可变区 酵母双杂交文库库容为 滴度为 随机挑取 个独立克隆进行菌落 鉴定 个含有 片段重组率为 选取其中 个测序均为独立克隆且多样性好该研究成功构建双峰驼天 然重链抗体可变区酵母双杂交文库且文库质量满足要求为进一步获得特定抗原的 奠定了基础 关键词双峰驼重链抗体可变区酵母双杂交 中图分类号 文献标志码 文章编号

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