梗阻性黄疸患者肠黏膜紧密连接蛋白claudin1、claudin4的表达及其意义.pdfVIP

中文摘要 梗阻性黄疸患者肠黏膜紧密连接蛋白claudin．1、 claudin．4的表达及其意义 摘 要 目的：梗阻性黄疸导致肠黏膜屏障功能损伤，从而产生 一系列并发症，如败血症和肾功能衰竭等。引起梗阻性黄疸 相关并发症的主要病理生理机制是因为肠屏障衰竭引起的 肠源性内毒素血症。临床和实验研究显示梗阻性黄疸肠屏障 损伤与肠黏膜通透性增加有关。肠黏膜通透性增加是梗阻性 黄疸患者细菌和内毒素易位，从而导致败血症和肾功能衰竭 的关键因素。但是，梗阻性黄疸肠黏膜通透性增加的分子机 制尚未完全清楚。有研究表明梗阻性黄疸肠黏膜通透性增加 可能与肠上皮细胞间紧密连接蛋白的表达变化有关。紧密连 接位于上皮细胞和内皮细胞侧膜的顶端形成通透屏障，调控 离子、大分子和细胞穿过旁细胞途径的通透性。它包括闭锁 occludins)蛋白 adhesion 以及连接黏附分子(junction 本实验通过光镜及电镜观察梗阻性黄疸患者肠黏膜形态学 及超微结构的改变，采用分光光度法检测血清内毒素 (endotoxin，ET)、二胺氧化酶(diamineoxidase，DAO)活性， 在梗阻性黄疸患者肠黏膜的表达情况，进一步探讨梗阻性黄 疸肠黏膜屏障功能损伤的机制。 学第二医院消化科行ERCP检查或治疗的25例胆管梗阻患 中文摘要 者，其中15例梗阻性黄疸患者作为梗阻性黄疸组，胆总管 结石患者6例，壶腹周围癌患者9例；其中10例梗阻无黄 疸患者作为梗阻无黄疸组，胆总管结石患者6例，壶腹周围 癌患者4例。收集10例行胃镜检查的健康受检者作为正常 对照组。3组患者均于行ERCP或胃镜检查当日取清晨空腹 外周静脉血4ml，采用分光光度法检测血清ET和DAO活 性。在ERCP或胃镜检查时于十二指肠降部Vater’壶腹远端 取活检，均钳取肠黏膜组织3块，其中l块以4％戊二醛固 定，制备电镜标本，用透射电镜观察肠黏膜超微结构的改变。 2块以10％甲醛固定，常规石蜡包埋，4 gm切片，HE染色， 光镜下观察肠黏膜的形态学改变进行肠黏膜损伤的病理学 评分，并采用免疫组织化学(SP)法检测肠黏膜上皮细胞间 10．0统计软件进行数据处理。 结果： 1．HE染色光镜下观察：正常对照组和梗阻无黄疸组 患者肠黏膜绒毛完整，上皮细胞排列整齐；梗阻性黄疸组患 者肠黏膜的绒毛完整性部分被破坏，表现为绒毛顶端上皮下 间隙增大，上皮层与固有层分离，绒毛两侧也有分离伴部分 绒毛顶端上皮层破损。梗阻性黄疸组患者肠黏膜损伤的病理 学评分(2．60-a：0．5 照组和梗阻无黄疸组患者相比无统计学差异(尸0．05)。 2．透射电镜下观察：正常对照组和梗阻无黄疸组患者 肠黏膜微绒毛排列整齐，连接复合体包括紧密连接完整，细 胞连接紧密；梗阻性黄疸组患者肠黏膜微绒毛明显稀疏，连 中文摘要 接复合体结构破坏，细胞连接增宽。 3．血清ET、DAO活性测定结果：梗阻性黄疸组患者 ‘ 组患者相比，血清ET、DAO活性均无统计学差异(胗0．05)。 黄疸组中，胆总管结石患者与壶腹周围癌患者相比，血清 ET、DAO活性均无统计学差异胗0．05)。 上皮细胞的细胞膜，为棕褐色的线状分布。梗阻性黄疸组患 而 claudin．4蛋白表达 (23．060／o_4：0．90％)(PO．05)， 表达均无统计学差异眇O．05)。另外，梗阻性黄疸组中， 胆总管结石患者与壶腹周围癌患者相比，肠黏膜claudin．1 和claudin．4蛋白表达均无统计学差异p0．05)。 结论：梗阻性黄疸患者存在一定程度的肠黏膜损伤， 导致肠源性内毒素血症。梗阻性黄疸患者肠黏膜上皮细胞间 中文摘要 能与梗阻性黄疸肠黏膜屏障损伤