口服生长抑素基因疫苗对小鼠免疫的初报研究.pdfVIP

范围内均有活性，且不受血清影响，所以可以州含血清的培养液配制，这样与削尤血清的腴蛋白酶消 化效果比较．可增加细胞的存活力。因此，选择适合的酶或酶组合消化组织块得到大量存活的单细胞 用于原代培养特别重要。本研究比较了I、Iv型胶原酶与胰蛋白酶组合后对魔鼠香囊腺组织的消化效 果。结果表明，用Ⅳ型胶原酶配合胰蛋白酶的消化可获得大量具有较强存活力的单细胞，消化结果明 显优于单独用胰蛋白酶或Ⅳ型胶原酶或I型胶原酶与胰蛋白酶组合的消化效果。 不同细胞对培养条件的要求不尽相同，合适的培养条件对建立培养体系至关重要。对于一种束曾 培养过的细胞．其基础培养液、添加因予、附着底物及培养温度、pH值等均需作仔细选择，特别是基 1640、 础培养液和添加因子对细胞生长增殖能力影响更大。常用于动物组织细胞的培养液有RPMI MEM、DMEM等’i忝力¨因子主要为各种生长因子和激素类物质。麝鼠香囊腺的生长、发育需要如类固 EGF、0．1mM 种培养液中的存活及增殖效果较羞。其中表皮生长冈7能推进细胞周期向前行进，促使细胞由Gl期进 入S期，促进细胞分裂1H：B谎基乙醇能对细胞起到很好的保护作用。本研究在培养条件合适的情况下， 观察了直接在培养皿中和铺有明胶的培养皿中麝鼠香囊腺上皮细胞的贴壁和增殖变化。结果表明，麝 鼠香囊腺上皮细胞的贴壁和增殖均不依赖于细胞外基质，培养在培养瓶中的香囊腺上皮细胞无需添加 细胞外基质即可生长。但用明胶作为附着底物时，可力¨快其贴壁速度．传代细胞可不用明胶做附着底 物。细胞冻存及复苏结果表明，冻存井复苏的香囊腺上皮细胞传代到第5代时，仍具有较强增殖能力， 没有调■迹象。本研究结果为进一步利用细胞T程方法大量生产人工麝鼠香打下了良好摹础。 参考文献： 【11陈玉1Il，魏海军K然动物香料新资源——麝鼠再J荇料新产品的研究【J】香料_香精化妆品，2002．10，5：6112-14 口I陈工山，佟燥人，新秀华，魏海币，李心宽，j|二琛玲麝鼠香腺发育与活体取香的初步研究fJ】兽类学报，1996，1(16)：43-47 【3l张学明小鼠精原：F2llr胞培养体系的优化及体外基因转移[D】博十学位论文，吉林大学，长群，2005 【4】李舟臣，任芳谢，张浦．【II羊乳腺上皮细胞的分离、培养与超微结构观察【J】畜牧兽医学报，2005，36(2)：12I．126 【5】陈玉山等麝鼠泌香期吞囊艨彤态及组织钻构的珂f究[JJ兽类学报，1996，6(2)：151．154 cells：Amanual ofanimW 【6】FreshneyRl．Culture ofbasictechnique[M]AlanRLiss—ewYork,1993 sJ．Animalcells：Culture 【7lDarlingDC，Morgan andmedia[M]．JohnWileyandSons，NewYork．1994 口服生长抑素基因疫苗对小鼠免疫的初报 严婷，杜念兴，杨倩+ (南京农业人学农业部动物生理生化重点开放实验室，托苏南京210095) 摘要：目的研究口服生妊抑素(SS)基因痘_I|c『对小鼠牛眨的影响以及在体内表达HBsA∥SS融合蛋0的 情况。方法Hj生长抑素基闻疫苗灌胄小鼠，_}l】姓姆萨染色后观察细菌在体内的分布；观察体重增长情况； 应_HJ采和免疫组化的方法(ABC法)分异0显示I。二指肠和卒肠巾乙盯表面抗原(HBsAg)阳性细胞平¨生长抑 棠Ml性细胞的分和及数景变化。结果生肠细茼数最从免疫扁16-20h返到高峰；|I}I脏枉免疫4r灭扁出现少量 细甜。小鼠体重从前次免疫第7阁起有一定增加，∞1两个试验组与对照组相比均不显著。前次免瞳后第3周 两个试验鲥小肠内f|j现HBsAg阳性细胞井维持至第7用：前次免礁后第5蒯和第7刷两个试验纰小肠内sS 懈l性耋Ii|胞数罱比划j!cl纽板显若减少(P001)。结论口吸型ss基因疫l’“免疫小鼠后小肠中。。些细胞可表达 HBsAg／SS融舟蛋白，}d州ss阳性鲕胞数量出减少，推测该基因疫苗刺激机体表达蛋白肝能j“生ss抗体。 关键词：生长抑紊接闻{芷苗；ss阳性细胞；HBsAg阳性细胞；小肠 基