λDNA体外重包装技术检测环境致突变物新方法及机理的研究.pdfVIP

维普资讯 一 z 第18卷 第 2期 重 庆 环 境 科 学 VoI．18No．2 J906舟： {月 CHONGQING ENVIRONMENTAL SCIENCE April， 1996 kDNA体外重包装技术检测环境致突变物 新方法及机理的研究 萱 堡 璺 第‘三军 医太学啊商臣学蒜，重庆 630038) c华南表韭大学蚕 学幕-广州 )l064z’ 许丽萍 大量的 B学物质L虹化工原料、农药、 药 品 变、DNA 断袭、DNA 交联等)，或 影 响 等)投放市场，而且大量废水、废气 ．废渣的 了^DNA 包装的任一环节及裂胞释放等功 排放已造成环境的严重污染，因而人们不可 能，均会导致噬菌斑发生率下降，与空白对 避免地要接触各种化学物质、污染物及其混 照相 比较即可检测受检化台物的遗传毒性。 合物。为了保护环境，确保人体健康 ，就必 将诱变物直接处理后的 DNA 进行酶切和 须了解化学物质及环境污染物的毒性、毒作 电泳，还可以初步分析 DNA 损份的讥理。 用特点，特别是反映其遗传毒性的致癌、致 为此，我们对构建新方法和检测受试物致突 畸、致突变性，从而评价其安全性。但是， 变性作了系统研究，并探讨了部分化合物在 如何获得遗传毒性的直接证据呢? 目前人们 DNA 水平上的损伤机理 ”。现 综合报道 越来越重视在 DNA 分子水平上阐明突变机 如下t 理 。 ^DNA 重包装技术是基 因工程中的一 1 材料和方法 项常用技术，它是将 DNA 分子与磋菌体 壳蛋 白在试管内混合，即可在离体条件下装 DNA 重包装技术，按 《分子克 隆操 配成有活性的噬菌体 颗粒 “。由于 ^噬菌 作指南》方案Ⅱ进行 “ DNA 与不同浓度化 体的DNA 序列及基因位点已研究得较为清 学受试物37℃共 同保育 30r i【，4℃终 止反 楚，其约2／3的基因均参与了^噬菌体的生命 应。处理后的 DNA 在小离心管 中与从深 周期活动。因此，我们设想用诱变物在体外 低温保存中取出的^噬菌体壳蛋白强台，在室 直接处理 DNA，然后 进 行体外重包装， 温下将 DNA 包装成有活性的 噬 菌 体 颗 如果诱变扬导致了^DNA 裂解生长周期基 粗。包装的噬苗体原液用sM液作倍比稀释， 然后取 10 1堪菌体稀释波和100#1LE392宿 收稿 日期：1995—02—2O 主菌液混台，铺平皿，37℃培养8～igh后计 · 国家 自旌科 学墓盘资助课膳 ．NO．3880680 数平 吼上的瑶菌斑数。 第一作者-曹佳 ，,FJ，33 ，第兰军医大学 障士毕业 ，现 任第三军医大学砸防医学 丹于毒理学实验室主匪 教授。 在本项 目研究中，我们啊此方法对32种 维普资讯 2期 曹佳蒋 )．DNA佛外殖包装技术硷测环境致突变物新方法厦机理 的砥究 4 化学受试物和紫外线的遗传毒性进行了检测 应用 “酶切一凝硬 电泳”分析方法，我