§9-1 吸光光度法基本原理.pptVIP

第9章 吸 光 光 度 法 安徽理工大学 化学分析：常量组分(1%), Er 0.1%～0.2% 依据化学反应, 使用玻璃仪器 9.1 吸光光度法的基本原理 特点 灵敏度高：测定下限可达10－5～10－6mol/L, 10-4%～10-5% 准确度能够满足微量组分的测定要求： 相对误差2～5％ 操作简便快速 应用广泛 1.光的基本性质 电磁波的波粒二象性 c－真空中光速 2108m/s ~3.0 ×108m/s λ－波长，单位：m,cm,mm,?m,nm,? 1?m=10-6m, 1nm=10-9m, 1?=10-10m ν－频率，单位：赫兹（周）Hz 次/秒 n－折射率，真空中为1 微粒性 h－普朗克(Planck)常数 6.626×10-34J·s ?－频率 E－光量子具有的能量 单位：J(焦耳)，eV(电子伏特) 波粒二象性 结论:一定波长的光具有一定的能量，波长越 长(频率越低)，光量子的能量越低。 单色光：具有相同能量(相同波长)的光。 混合光：具有不同能量(不同波长)的光复合在 一起。 光学光谱区 分子吸收光谱与电子跃迁 苯和甲苯在环己烷中的吸收光谱 3. 光吸收基本定律: Lambert-Beer定律 吸光度与光程的关系 A =εbc 吸光度与浓度的关系 A =εbc T－透光率（透射比）（Transmittance） 吸光度A、透射比T与浓度c的关系 吸光系数 Absorptivity 4.比尔定律的适用条件（偏离比尔定律的原因 单色光 应选用?max处或肩峰处测定 2. 吸光质点形式不变 离解、络合、缔合会破坏线性关系 应控制条件(酸度、浓度、介质等) 3. 稀溶液 浓度增大，分子之间作用增强 6. 吸光度的加和性与吸光度的测量 * 马家举 化学分析与仪器分析方法比较 仪器分析：微量组分(1%), Er 1%～5% 依据物理或物理化学性质, 需要特殊的仪器 例: 含Fe约0.05%的样品, 称0.2g, 则m(Fe)≈0.1mg 重量法 m(Fe2O3)≈0.14mg, 称不准 容量法 V(K2Cr2O7)≈0.02mL, 测不准 光度法 结果0.048%～0.052%, 满足要求 准确度高 灵敏度高 吸光光度法是基于被测物质的分子对光具有选择性吸收的特性而建立起来的分析方法。 光的传播速度: 波动性 光量子，具有能量。 真空中: (真空紫外) 远红外 中红外 近红外 可见 近紫外 远紫外 10nm~200nm 200nm ~400nm 400nm ~ 780nm 780 nm ~ 2.5 ?m 2.5 ?m ~ 50 ?m 50 ?m ~300 ?m 物质分子内部三种运动形式： 1.电子相对于原子核的运动， 2.原子核在其平衡位置附近的相对振动 3.分子本身绕其重心的转动。 分子具有三种不同能级：电子能级、振动能级和转动能级。 这三种能级都是量子化的，且各自具有相应的能量。 分子的内能：电子能量Ee 、振动能量Ev 、转动能量Er 即Ｅ＝Ｅe+Ｅv+Ｅr ΔΕeΔΕvΔΕr 三种能级跃迁:电子能级间跃迁的同时，总伴随有振动和转动能级间的跃迁。即电子光谱中总包含有振动能级和转动能级间跃迁产生的若干谱线而呈现宽谱带。 2. 溶液中溶质分子对光的吸收与吸收光谱 蓝绿 红 650-760 绿蓝 橙 610-650 蓝 黄 580-610 紫 黄绿 560-580 红紫 绿 500-560 红 蓝绿 490-500 橙 绿蓝 480-490 黄 蓝 450-480 黄绿 紫 400-450 互补光 颜色 ?/nm 不同颜色的可见光波长及其互补光 300 400 500 600 700 ?/nm 350 525 545 Cr2O72- MnO4- 1.0 0.8 0.6 0.4 0.2 Absorbance 350 Cr2O72-、MnO4-的吸收光谱 苯(254nm) 甲苯(262nm) A ? 230 250 270 A=lg(I0/It)=εbc It I0 b dx I I-dI s 朗伯定律(1760) A=lg(I0/It)=k1b 比尔定律(1852) A=lg(I0/It)=k2c 吸光度 介质厚度