清上蠲痛合剂对偏头痛大鼠CGRP的影响.docVIP

精品论文 参考文献 清上蠲痛合剂对偏头痛大鼠CGRP的影响 李婧辉1 周 恒1 徐鸿雁2 　　（1河北省迁安市中医医院内一科 河北 唐山 064400） 　　（2承德医学院附属医院中医科 河北 承德 067000） 　　【摘 要】目的：观察清上蠲痛合剂对偏头痛大鼠的预防作用及对血清中降钙素相关基因肽（CGRP）、一氧化氮（NO）；beta;—内啡肽（EP）的影响。方法：分组方法及给药方式 采用硝酸甘油(GTN)皮下注射法建立偏头痛大鼠模型，将成年健康SD大鼠72只，雌雄各半，体重188.29gplusmn;7.60g，随机分为正常组（生理盐水剂量：与等效剂量等容积），模型组（生理盐水剂量：与等效剂量等容积），清上蠲痛合剂高中低剂量治疗组（等效剂量，7.46g/(kg?d)），舒马普坦组（等效剂量，4.5mg/(kg?d)，浓度是1ml/mg），以上每组12只。预防组及模型组连续给药6天后造模用药。除正常组外，其余各组采用皮下注射硝酸甘油方法复制大鼠偏头痛模型，观察其耳红、甩头或挠头、爬笼出现时间、次数及持续时间等行为学指标后，采用酶联免疫法吸附法（ELISA）测定各组大鼠血清中CGRP、NO、EP的含量。结果：与正常组相比，造模后模型组大鼠血清CGRP和NO含量较正常组升高（Ple;0.001），清上蠲痛合剂高、中剂量治疗组及琥珀酸舒马普坦治疗组均能抑制上述改变（P lt; 0.05），高、中剂量治疗组和舒马普坦对照组之间无统计学意义（（P gt; 0.05））。清上蠲痛合剂高、中剂量治疗组与清上蠲痛合剂低剂量治疗组比较，CGRP、NO的含量下降（P lt; 0.05），有统计学意义。造模后模型组大鼠血清beta;-EP含量较正常组下降（P lt;le;0.001）；清上蠲痛合剂高、中剂量治疗组及琥珀酸舒马普坦治疗组大鼠血清中beta;-EP含量较模型组明显升高（P lt; 0.05），舒马普坦对照组、及清上蠲痛合剂高、中剂量治疗组之间无统计学意义（（P gt; 0.05））。清上蠲痛合剂高、中剂量治疗组与清上蠲痛合剂低剂量治疗组比较，EP的含量上升（P lt; 0.05），有统计学意义。清上蠲痛合剂能明显预防和改善大鼠偏头痛发作，可能与调节机体CGRP、NO、EP的释放有关。 　　【关键词】清上蠲痛合剂；偏头痛；降钙素相关基因肽；一氧化氮；beta;—内啡肽 　　【中图分类号】R747.2 【文献标识码】B 【文章编号】1003-5028（2015）5-0064-02 　　清上蠲痛合剂是我院全国第三批名老中医万政据明代●龚延贤《寿世保元》中古方清上蠲痛方结合多年临床经验研制而成院内制剂--清上蠲痛合剂。具有养血活血、祛风通络、兼以调补气血固本之效，在临床中应用于各类急、慢性头痛取得了可喜的疗效。但其作用机制尚不清楚，也缺少相关的动物实验。本研究便是从实验研究方面对清上蠲痛合剂对偏头痛大鼠模型行为学及血清中的降钙素相关基因肽、beta;-EP、NO及的表达等方面进行研究，为进一步传承名老中医良方和临床推广运用清上蠲痛合剂防治偏头痛提供实验依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 动物及分组 实验用SPF级SD大鼠72只，雌性各半，体重160-180g，在河北联合大学实验动物中心屏障环境动物实验室进行，实验动物使用许可证为：SYXK（冀）2010-0088，动物合格证号为：0002027，动物生产许可证号为：SCXK-（军）2009003。适应症饲养7天后（体重205.22gplusmn;6.65g）随机分为正常组（生理盐水剂量：与等效剂量等容积），模型组（生理盐水剂量：与等效剂量等容积），清上蠲痛合剂高、中、低剂量治疗组（等效剂量，7.46g/(kg?d)），舒马普坦组（等效剂量，4.5mg/(kg?d)，浓度是1ml/mg），以上每组12只。分别单独在代谢笼中饲养于恒定温度（21plusmn;3）℃的屏障实验室内，湿度（75plusmn;5）%，光暗周期为12h，动物自由摄食及饮水。 　　1.2 药物及试剂 清上蠲痛合剂(250ml/瓶，浓度：0.836g/ml，由迁安市中医医院制剂室制备，批准文号：冀药制字，硝酸甘油注射液（每支5mg/1ml，由北京益民药业有限公司生产，批准文号：国药准字HI3023201），琥珀酸舒马普坦片（每片100mg，由天津华津制药有限公司生产，批准文号：国药准字。CGRP试剂盒（Elisa）、beta;-EP试剂盒、NO试剂盒（Elisa）（天津市灏羊生物制品科技有限责任公司提供，货号：RATCCGP2013、RATNO2013、RATEP2013） 　　1.3 造模和干预 根据成人清上蠲痛合剂及琥珀酸舒马普坦片每日