特利加压素和FK409联合应用对活体肝移植小肝综合征的保护性治疗研究.docVIP

精品论文 参考文献 特利加压素和FK409联合应用对活体肝移植小肝综合征的保护性治疗研究 李来邦 陈奕明 张升宁 高杨 任刚 张春平 熊庚 马俊 　　(1昆明医科大学附属甘美医院暨昆明市第一人民医院 650000) 　　【摘要】目的 探讨特利加压素和FK409联合应用对鼠40％小体积肝移植小肝综合征的保护性治疗作用及其机制。方法 将80只大鼠随机分为特利加压素(terlipressin )治疗组、FK409治疗组、特利加压素和FK409联合治疗组及生理盐水治疗对照组(四组，n=20)。观察比较各组存活率，分别于术后药物治疗后1、4、7和10天各组随机每个时间点血清学检查丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TB)及一氧化氮（NO）水平和半定量RT- PCR分析肝脏组织Egr-1基因mRNA表达变化。结果 血清丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TB)、一氧化氮（NO）含量与特利加压素、FK409治疗对小体积肝移植小肝综合征的治疗作用具有相关性，各亚组之间及各组内每个亚组与对照组比较差异具有统计学意义(Plt;0.05)，可以作为小体积肝移植小肝综合征治疗效果的评价指标。结论 小体积肝移植小肝综合征状态属一过性改变。特利加压素和FK409联合治疗能有效缓解门静脉高灌注状态，可以降低门静脉压力及血流量，能显著提高肝大部切除术后小体积肝存活率，联合治疗方案治疗可有效针对发病环节，获得良好疗效。 　　【关键词】 小肝综合征 特利加压素 FK409 一氧化氮 　　【中图分类号】R73-35+2 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2014）17-0025-03 　　前言 　　小肝综合征(SFSS, small-for -size syndrome) 是发生在扩大肝切除或部分肝脏移植后的临床综合征。植入肝脏体积过小导致功能上不能满足受体需求而出现术后持续胆汁淤积，肝脏合成功能迁迟恢复，凝血机制紊乱，门静脉高压，严重者会出现顽固性腹水，其发病机制目前还不甚明了，是困扰肝脏外科医生的一大临床难题[1-3]。近年来药物治疗方案均有报道[4]，基于对SFSS发病机制的研究和理解之上的各种尝试，本研究在成功建立的大鼠小体积肝移植术后小肝综合征模型上，分别利用特利加压素（terlipressin）降低门静脉压力[5]、FK409促释放NO以及两种药物联合机制保护性治疗小肝综合征，对小体积肝移植后肝脏Egr-1[6] 和血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及总胆红素(TB)、一氧化氮 (NO) 水平进行动态观察，评价三种治疗方法的疗效，并初步探讨移植肝损伤的分子机制。 　　1.材料与方法 　　1.1. 实验动物与分组 　　健康成年雄性SD大鼠80只，重270- 350g,由广东省实验动物中心提供，动物自由摄食饮水，饲养温度21－22℃，湿度40－60％，光照12小时（06:00-18:00）、黑暗12小时（18:00-06:00）。随机选取20只为NS治疗对照组(A组)，剩余60只大鼠按我室方法成功建立40％小体积肝移植动脉化模型，随机分为三组:(1)特利加压素治疗组(B组);(2)FK409治疗组(C组);(3)特利加压素和FK409联合应用治疗组(D组)。给药方案:根据相关文献资料设计给药方案[3]。A组：空白对照组（n=20），未作任何处理。B组：特利加压素组（n=20），受体于门静脉阻断前10min按0.05mg/kg剂量行阴茎背静脉注射给予特利加压素一次C组：FK409组(n=20)，供体于取肝前30min,由阴茎静脉缓慢注射FK409,2mg/kg;受体于移植后,门静脉、肝上肝下、下腔静脉血流开放后立刻由阴茎静脉注射FK409,1mg/kg。D组：特利加压素联合FK409组(n=20，特利加压素和FK409用法同C、D组。每组留5只检测门静脉压力，其余分别于术后1、4、7和10天各组随机每个时间点处死5只取血标本和肝脏标本送检。移植术后将大鼠置于单笼饲养，恢复饮水和进食，饲养环境温度保持在20℃左右，观察大鼠皮毛、眼睛、黄饮食、活动和精神状态。 　　1.2 药品与试剂 　　特利加压素(深圳翰宇药业股份有限公司)； FK409 (南京大治生物科技有限公司)；Trizol RNA提取试剂盒(美国Invitrogen公司)； 逆转录试剂盒、PCR试剂盒(美国Fermentas公司)；血清谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TB)测试剂盒(上海科华公司)；一氧化氮（NO）检测试剂盒（碧云天）； 　　1.2.1门静脉压力测定 　　门静脉压力测定24G穿刺针直接穿刺门静脉，连接压力换能器(YP100型